[發明專利]牦牛血超氧化物歧化酶及其提取純化工藝和應用無效
| 申請號: | 00113802.2 | 申請日: | 2000-04-28 |
| 公開(公告)號: | CN1321743A | 公開(公告)日: | 2001-11-14 |
| 發明(設計)人: | 蘇普 | 申請(專利權)人: | 蘇普 |
| 主分類號: | C12N9/08 | 分類號: | C12N9/08;C07K1/36;A61K38/44;A61K7/02;A23L1/30 |
| 代理公司: | 中國科學院蘭州專利事務所 | 代理人: | 王玉雙 |
| 地址: | 730050 甘*** | 國省代碼: | 甘肅;62 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 牦牛 超氧化物歧化酶 及其 提取 純化 工藝 應用 | ||
1、一種牦牛血超氧化物歧化酶,其特征在于它由下述方法制備獲得:①將牦牛血去除血漿得紅血球,用紅血球的2-4倍體積的鹽液清洗紅血球2-6次,再往紅血球內加入0.5-1.5倍的水,攪拌使其溶血;②將溶血液冷卻至4-4℃,加入溶血液體積的0.15-0.35倍、溫度為至少-10℃、濃度為9-98%的醇和溶血液體積的0.1-0.2倍、濃度為90-98%的氯仿,混合后再稀釋去除雜蛋白得蛋黃色上清液;③將醇相上清液升溫至室溫再加入體積比為1∶(0.5-1.5)的固體磷酸氫二鉀;分離得淡藍色上清液;④將③步最后的上清液冷卻至至少0℃,再加入上清液體積的0.5-1倍、溫度為至少-10℃的丙酮,然后得到沉淀物,用水溶解沉淀物,將溶解液置于透析袋中相對于2.5mm、PH7-6的KH2PO4-K2HPO4的緩沖液透析,離心透析液得淡綠色清液,⑤將淡綠色清液進行超濾即得超氧化物歧化酶。
2、一種牦牛血超氧化物歧化酶的提取純化工藝,其特征在于包括下述工藝步驟:①將牦牛血除去血漿得紅血球,用紅血球體積的2-4倍、0.5-1.5%的鹽液清洗紅血球2-6次,再往紅血球內加入體積比為1∶(0.5-1.5)的水,攪拌后使其溶血;②將溶血液冷卻至4-4℃,攪拌加入溶血液體積的0.15-0.35倍、溫度為至少-10℃、90-98%的醇和溶血液體積的0.1-0.2倍、90-98%的氯仿,混合攪拌,再加入溶血液體積的0.2倍的水稀釋,離心去除雜蛋白,得蛋黃色上清液,測定其SOD總活力;③將乙醇相上清液升至室溫,加入上清液體積的0.5-1.5倍的固體磷酸氫二鉀溶解,靜置分離得上相液,上相液含有氯仿、醇和少量鹽,離心上相液得淡藍色上清液;④將③步中最后的上清液冷卻至至少0℃,邊攪邊加入上清液體積的0.5-1倍、溫度為至少-10℃的丙酮,離心后得藍綠色沉淀,然后往沉淀物中加入沉淀物體積的0.5-1.5倍的水溶解;溶解液放透析袋中相對于2.5mm、PH7.6的KH2PO4-K4HPO4緩沖液透析,離心透析液得淡綠色清液;⑤將淡綠色清液超濾即得牦牛血紅胞超氧化物歧化酶。
3、如權利要求1所述的牦牛血超氧化物歧化酶的應用,其特征在于牦牛超氧化物歧化酶在保健品中的應用。
4、如權利要求1所述的牦牛血超氧化物歧化酶的應用,其特征在于牦牛血超氧化物歧化酶在藥品中的應用。
5、如權利要求1所述的牦牛血超氧化物歧化酶的應用,其特征在于牦牛血超氧化物歧化酶在食品中的應用。
6、如權利要求1所述的牦牛血超氧化物歧化酶的應用,其特征在于牦牛血超氧化物歧化酶在化妝品中的應用。
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