[發(fā)明專利]一種新的多肽——人Yiplp28和編碼這種多肽的多核苷酸

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 00111973.7
• 申請(qǐng)日: 2000-03-10
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN1313307A
• 公開(kāi)（公告）日: 2001-09-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 毛裕民;謝毅
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海博德基因開(kāi)發(fā)有限公司
• 主分類號(hào): C07K14/435
• 分類號(hào): C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/17;A61K38/16;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
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本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地說(shuō)，本發(fā)明描述了一種新的多肽--人Yiplp28，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發(fā)明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應(yīng)用。

所有蛋白質(zhì)和處于分泌性細(xì)胞器與細(xì)胞內(nèi)吞途徑之間的細(xì)胞膜運(yùn)輸都有一個(gè)復(fù)雜的調(diào)節(jié)機(jī)制。這個(gè)復(fù)雜機(jī)制保證了小泡蛋白運(yùn)輸?shù)奶禺愋院椭苯有裕瑫r(shí)亦保證了細(xì)胞器之間的膜物質(zhì)動(dòng)態(tài)平衡。實(shí)驗(yàn)證明，不管是特殊運(yùn)輸步驟的特異性蛋白還是在不同運(yùn)輸步驟中的具有相似功能的蛋白都參加了小泡運(yùn)輸[Rothman,J.E.and?Wieland,F.T.(1996)Science,272,227-234]。這些蛋白中的一些蛋白在進(jìn)化上高度保守[Bennett,M.K.andScheller,R.H.(1994)Annu.Rev.Biochem.,63,63-100]。這些蛋白是Ypt/Rab家族的同數(shù)GTP酶，Ypt/Rab家族成員在小泡對(duì)接以及膜融合過(guò)程中起決定性作用[Lazar,T.,GOETTE,m.AND?Gallwitz,D.(1997)Trends?Biochem.Sci.,22,468-472]。GTP酶在轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程中與小泡蛋白融合作為小泡蛋白的一部分運(yùn)輸，所以這個(gè)過(guò)程是短暫的并難以通過(guò)生物化學(xué)的方法來(lái)研究。但是用雙雜交的方法就能夠研究這種蛋白與蛋白之間的反應(yīng)。因此，生物學(xué)家就運(yùn)用酵母雙雜交的方法來(lái)研究酵母GTP酶Yptlp和Ypt31p。這兩個(gè)GTP酶是蛋白質(zhì)從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)到高爾基體以及高爾基體內(nèi)部所必須的。在研究過(guò)程中發(fā)現(xiàn)了一個(gè)27kDa的蛋白Yiplp，它特異結(jié)合于野生型GTP酶，但不是Ypt6p或Ypt7p。Yiplp參與與兩個(gè)YptGTP酶的特異性膜結(jié)合，該結(jié)合過(guò)程貫穿于整個(gè)生物合成階段。

Ypt/Rab?GTP酶是膜運(yùn)輸在分泌特定階段和細(xì)胞內(nèi)吞運(yùn)輸過(guò)程中所必不可少的調(diào)節(jié)子[Novick,P.and?Zerial,M.(1997)Curr.Opin.Cell?Biol.,9,496-504]。Yiplp是一個(gè)完整的膜蛋白并特異結(jié)合于兩個(gè)不同的GTP酶，Yptlp和Ypt31p。Yiplp特異結(jié)合這兩個(gè)GTP酶后將他們轉(zhuǎn)運(yùn)至高爾基膜，其實(shí)Yiplp就是一個(gè)GTP酶受體。

Yiplp有完整膜蛋白所具有的一切結(jié)構(gòu)特征，例如占據(jù)半個(gè)分子大小位于C末端的跨膜結(jié)構(gòu)域，其N末端朝向細(xì)胞質(zhì)[Xiaoping?Yang,Hugo?T.et?al.,(1998)EM?BO?J?sep1；17(17):4954-4963]。Yiplp以非常穩(wěn)定的形式存在于高爾基膜上并在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)高度表達(dá)。

本發(fā)明的人的多肽與Yiplp在蛋白質(zhì)水平上有41％的相同性和60％的相似性，并且具有與Yiplp相似的保守特征性序列片段。基于以上各點(diǎn)故認(rèn)為本發(fā)明的新基因與編碼Yiplp相似的基因，命名為人Yiplp28，并推測(cè)其具有相似的生物學(xué)功能。

由于如上所述人Yiplp28蛋白在調(diào)節(jié)細(xì)胞分裂和胚胎發(fā)育等機(jī)體重要功能中起重要作用，而且相信這些調(diào)節(jié)過(guò)程中涉及大量的蛋白，因而本領(lǐng)域中一直需要鑒定更多參與這些過(guò)程的人Yiplp28蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人Yiplp28蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態(tài)下的作用提供了基礎(chǔ)。這種蛋白可能構(gòu)成開(kāi)發(fā)疾病診斷和/或治療藥的基礎(chǔ)，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發(fā)明的一個(gè)目的是提供分離的新的多肽——人Yiplp28以及其片段、類似物和衍生物。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供含有編碼人Yiplp28的多核苷酸的重組載體。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供含有編碼人Yiplp28的多核苷酸的基因工程化宿主細(xì)胞。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供生產(chǎn)人Yiplp28的方法。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供針對(duì)本發(fā)明的多肽——人Yiplp28的抗體。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供了針對(duì)本發(fā)明多肽——人Yiplp28的模擬化合物、拮抗劑、激動(dòng)劑、抑制劑。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供診斷治療與人Yiplp28異常相關(guān)的疾病的方法。

本發(fā)明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO:2氨基酸序列的多肽。

本發(fā)明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補(bǔ)的多核苷酸；