[發(fā)明專利]一種新的多肽——人核糖體蛋白S4－19和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 00111943.5
• 申請日: 2000-03-07
• 公開（公告）號: CN1312291A
• 公開（公告）日: 2001-09-12
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權(quán)）人: 上海博德基因開發(fā)有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/17;A61K38/16;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
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本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地說，本發(fā)明描述了一種新的多肽——人核糖體蛋白S4-19，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發(fā)明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

核糖體是細胞的主要成分之一，其在生物體內(nèi)不斷地沿著mRNA移動，以極快的速度合成肽鏈，是生物體將mRNA翻譯成肽鏈的主要場所。核糖體蛋白按照一定的順序與rRNA結(jié)合以及蛋白質(zhì)之間的相互結(jié)合，組裝成兩個核糖體亞基-一個大亞基和一個小亞基，其中大亞基約是小亞基的兩倍，而rRNA直接參與mRNA和tRNA的結(jié)合。核糖體和它的輔助因子結(jié)合在一起，擁有蛋白合成各階段所需要的全部酶活性。這些酶活性只有在核糖體整體結(jié)構(gòu)存在的情況下才具備，核糖體蛋白質(zhì)和rRNA都不能單獨參與蛋白合成反應。

不論是真核生物還是原核生物，其核糖體都由大小兩個亞基組成，各種核糖體蛋白質(zhì)在大小亞基內(nèi)都有特定的位置，rRNA是其中的骨架。有的核糖體蛋白直接與rRNA結(jié)合，這些蛋白與rRNA結(jié)合后改變了rRNA的構(gòu)象，從而使另一些蛋白再與rRNA結(jié)合，是維持核糖體構(gòu)象的重要組成成分；而有些核糖體蛋白不直接與rRNA結(jié)合，而是結(jié)合在其他蛋白質(zhì)上，這些蛋白在生物體內(nèi)與其他蛋白協(xié)同作用，使核糖體發(fā)揮正常的生理功能。所有的核糖體蛋白構(gòu)成了一個獨立的蛋白家族，即核糖體蛋白家族。

許多真核生物及古細菌的核糖體蛋白按其不同的序列相似性可分為不同的類型。核糖體蛋白S4e就是其中的一類。哺乳動物的S4蛋白含有兩個高度保守的蛋白異構(gòu)體，一種由Y染色體上的一個基因編碼，一個由X染色體上的一個基因編碼。這兩個不同染色體編碼的S4蛋白，在序列上亦有很高的同源性，且均是核糖體亞單位組裝的重要分子，其缺失將導致亞單位中其它一些蛋白的缺失，從而無法形成正常的、具有活性功能的核糖體，即影響蛋白的翻譯。

核糖體蛋白S4均由233-210個氨基酸殘基組成，且這些蛋白的N末端均含有一由15個氨基酸組成的如下所示的一致性序列片段：H-X-K-R-[LIVMF]-[SANK]-X-P-X(2)-[WY]-X-[LIVM]-X-[KRP]；這一序列片段中由四個氨基酸殘基是高度可變的殘基。該序列片段是蛋白與核糖體rRNA及其它核糖體組成蛋白結(jié)合的中心區(qū)域，該區(qū)域特殊位點的突變將導致細胞無法形成正常的核糖體亞單位，即影響一些蛋白的正常表達。因而，該蛋白在生物體蛋白翻譯的過程中起著極為重要的作用，其與其它各種蛋白協(xié)同作用以調(diào)控生物體內(nèi)一些蛋白的表達。該蛋白的表達異常將引起一些與蛋白翻譯水平調(diào)控異常相關(guān)的疾病。其通常與生物體內(nèi)各種發(fā)育紊亂癥、代謝紊亂癥、一些腫瘤及癌癥的發(fā)生等疾病的發(fā)生密切相關(guān)。另據(jù)研究發(fā)現(xiàn)，因在哺乳動物中S4e蛋白的表達分別由X和Y染色體上的不同基因表達，因而其還可能與一些先天性性器官發(fā)育不良癥的發(fā)生相關(guān)，如：卵巢發(fā)育不全等。

通過基因芯片的分析發(fā)現(xiàn)，在胸腺、睪丸、肌肉、脾臟、肺、皮膚、甲狀腺、肝、PMA+的Ecv304細胞株、PMA-的Ecv304細胞株、未饑餓的L02細胞株、砷刺激1小時的L02細胞株以及前列腺組織中，本發(fā)明的多肽的表達譜與人核糖體蛋白S48的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發(fā)明被命名為人核糖體蛋白S4-19。

由于如上所述人核糖體蛋白S4-19蛋白在調(diào)節(jié)細胞分裂和胚胎發(fā)育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調(diào)節(jié)過程中涉及大量的蛋白，因而本領(lǐng)域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人核糖體蛋白S4-19蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人核糖體蛋白S4-19蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態(tài)下的作用提供了基礎(chǔ)。這種蛋白可能構(gòu)成開發(fā)疾1病診斷和/或治療藥的基礎(chǔ)，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發(fā)明的一個目的是提供分離的新的多肽——人核糖體蛋白S4-19以及其片段、類似物和衍生物。

本發(fā)明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發(fā)明的另一個目的是提供含有編碼人核糖體蛋白S4-19的多核苷酸的重組載體。

本發(fā)明的另一個目的是提供含有編碼人核糖體蛋白S4-19的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發(fā)明的另一個目的是提供生產(chǎn)人核糖體蛋白S4-19的方法。

本發(fā)明的另一個目的是提供針對本發(fā)明的多肽——人核糖體蛋白S4-19的抗體。

本發(fā)明的另一個目的是提供了針對本發(fā)明多肽——人核糖體蛋白S4-19的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發(fā)明的另一個目的是提供診斷治療與人核糖體蛋白S4-19異常相關(guān)的疾病的方法。