[發明專利]一種新的多肽——beta轉導素11和編碼這種多肽的多核苷酸無效
| 申請號: | 00111908.7 | 申請日: | 2000-03-07 |
| 公開(公告)號: | CN1312256A | 公開(公告)日: | 2001-09-12 |
| 發明(設計)人: | 毛裕民;謝毅 | 申請(專利權)人: | 上海博德基因開發有限公司 |
| 主分類號: | C07K14/00 | 分類號: | C07K14/00;C07K14/435;C07K16/00;C07K16/18;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/16;A61K38/17;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 多肽 beta 轉導 11 編碼 這種 多核苷酸 | ||
本發明屬于生物技術領域,具體地說,本發明描述了一種新的多肽——beta轉導素11,以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。
轉導素是一種可激活cGMP特異性磷酸二酯酶的G蛋白。Beta-轉導素(G-beta)是G蛋白三個亞基中的一個,它在轉膜受體產生的信號轉導中起承上啟下的作用。Alpha亞基結合并水解GTP;beta亞基和gamma亞基則是GTP置換GDP以及膜錨定和識別受體所必須的。
在高級真核生物中,G-beta屬于一個小的多基因含有大約340個保守氨基酸殘基的家族。G-beta結構由8個串聯的大約40個氨基酸的重復子組成,每一個重復子包含一個中心的Trp-Asp基元(WD-40)。這樣的重復結構存在于許多蛋白中。重復結構的數目在這些蛋白中由5-8變化。在G-beta和G-beta類似蛋白中,重復子結構幾乎分布于整個序列中,而在其它蛋白中,它們只分布于N末端,中心部分或C末端。
WD-40可以分為兩個相對保守的元素,A和B,它們的序列和長度都是不一樣的。WD-40結構中最重要的特征是A元素的LxGH和B元素的[D,N]XXXXX[W,F,Y][D,N]模式。連接區域,n1和n2包含了許多帶電荷的氨基酸殘基和脯氨酸。單個重復單位之間的距離非常大,但nl=8的氨基酸似乎導致總的重復子的長度大約是42-43個氨基酸。
D-40家族蛋白分布廣泛:有的在核內,有的在質膜上,有的作為細胞骨架成分。
通過基因芯片的分析發現,在胸腺、睪丸、肌肉、脾臟、肺、皮膚、甲狀腺、肝、PMA+的Ecv304細胞株、PMA-的Ecv304細胞株、未饑餓的L02細胞株、砷刺激1小時的L02細胞株以及前列腺組織中,本發明的多肽的表達譜與beta轉導素41的表達譜非常近似,因此二者功能也可能類似。本發明被命名為beta轉導素11。
由于如上所述beta轉導素11蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用,而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白,因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的beta轉導素11蛋白,特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新beta轉導素11蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎,因此分離其編碼DNA是非常重要的。
本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——beta轉導素11以及其片段、類似物和衍生物。
本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。
本發明的另一個目的是提供含有編碼beta轉導素11的多核苷酸的重組載體。
本發明的另一個目的是提供含有編碼beta轉導素11的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。
本發明的另一個目的是提供生產beta轉導素11的方法。
本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——beta轉導素11的抗體。
本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——beta轉導素11的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。
本發明的另一個目的是提供診斷治療與beta轉導素11異常相關的疾病的方法。
本發明涉及一種分離的多肽,該多肽是人源的,它包含:具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地,該多肽是具有SEQ?ID?NO:2氨基酸序列的多肽。
本發明還涉及一種分離的多核苷酸,它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體:
(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸;
(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸;
(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70%相同性的多核苷酸。
更佳地,該多核苷酸的序列是選自下組的一種:(a)具有SEQ?ID?NO:1中109-399位的序列;和(b)具有SEQ?ID?NO:1中1-968位的序列。
本發明另外涉及一種含有本發明多核苷酸的載體,特別是表達載體;一種用該載體遺傳工程化的宿主細胞,包括轉化、轉導或轉染的宿主細胞;一種包括培養所述宿主細胞和回收表達產物的制備本發明多肽的方法。
本發明還涉及一種能與本發明多肽特異性結合的抗體。
本發明還涉及一種篩選的模擬、激活、拮抗或抑制beta轉導素11蛋白活性的化合物的方法,其包括利用本發明的多肽。本發明還涉及用該方法獲得的化合物。
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