[發明專利]一種新的多肽——人鋅指蛋白72和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00111866.8
• 申請日: 2000-03-02
• 公開（公告）號: CN1311245A
• 公開（公告）日: 2001-09-05
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/17;A61K38/16;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽--人鋅指蛋白72，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

鋅指蛋白為生物體內很大的一類轉錄調節因子，調控著生物體內各組織基因的轉錄與表達。轉錄調控因子在生物體內參與決定基因在何種組織及何種發育階段開始轉錄。編碼這類蛋白的基因如發生突變，不但該基因自身不能正常表達，而且受其調節的許多基因也不能正常的進行轉錄與表達。鋅指蛋白對基因表達的調控主要通過與特定的DNA序列結合來完成，現在發現也有一些鋅指蛋白可與RNA結合，在生物體各種重要的信號轉導過程中起調節作用。鋅指蛋白在生物體內的分別非常廣泛，按其結構特征又可分為各種不同的種類及亞家族，不同亞家族的成員在生物體內協同作用，以正確地調節不同基因的轉錄與表達及一些重要信號轉導途徑的完成。

鋅指蛋白為編碼鋅離子介導的核苷酸結合蛋白多基因家族中的成員，按這些蛋白鋅指結構域的不同可將這些蛋白分為不同的類型，其中C2H2型鋅指蛋白是分布最廣的一類。C2H2型鋅指蛋白中有一部分蛋白其蛋白序列中含有果蠅Kruppel基因保守的序列片段，這些蛋白構成了獨立的C2H2型鋅指蛋白Kruppel亞家族。該亞家族的成員均含有C2H2型鋅指蛋白家族共有的由28-30個氨基酸組成的保守的鋅指重復基序：(F/Y)XCXXCXXXFXXXXXLXXHXXXHTGEKP。此外，該亞家族各成員的鋅指結構基序間還由一保守的H/C連接區域連接在一起，該區域含有保守的氨基酸序列：TGEKPY/F[Schuh?R.,Aicher?W.Et?al.,Cell,1986,47:1025-1032]。

1991年，Bellefroid等人指出，該Kruppel亞家族中約有三分之一的成員在其N末端還含有一由75個氨基酸組成的保守基序，并將此基序命名為KRAB(Kruppel-associated?box)結構域。該結構域為鋅指蛋白N末端與DNA結合的結構域，在進化上高度保守[Judith?F.Margolin?et?al.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,1994,91:4509-4513]。該結構域由A、B兩個盒結構組成，其中富含變化的氨基酸殘基，形成兩個親水性螺旋。KRAB結構域為一潛在的轉錄抑制結構域，其中由45個氨基酸組成的親水性螺旋片段為轉錄抑制所必須的，螺旋結構中氨基酸的替換將減弱蛋白對轉錄的抑制功能，從而導致基因轉錄表達的失調及引發各種發育及惡性紊亂相關的疾病。

人們已從酵母、果蠅、鼠及人等多種生物體中分離得到了各種C2H2型鋅指蛋白Kruppel亞家族中的成員。1991年，Bellegroid等人從鼠及爪蟾體內克隆得到了兩個KRAB型鋅指蛋白；1993年，Bellegroid等人又從人體內克隆得到鋅指蛋白Kruppel亞家族的另一個成員ZNF91，該蛋白亦為一含KRAB盒結構的鋅指蛋白；1999年，Rosati等人又從人從克隆得到了一新的KRAB鋅指蛋白ZNF41。ZNF41蛋白為一潛在的轉錄抑制物，其蛋白序列中含有一DNA結合結構域及一轉錄抑制結構域，其在生物體內參與調控各種基因的轉錄與表達。研究發現，該蛋白在生物體的表達通常與X染色體特定區域的活性相關，其通過調節X染色體特定區域的活性來調節與之相關的特定區域的基因的轉錄與表達的水平[M.Rosati,A.Franze?et?al.,1999,Cytogenet?Cell?Genet,85:291-296]。

本發明的人的基因與已知人鋅指蛋白ZFP41在蛋白水平上有47％的同一性和62％的相似性，且與ZFP41相似，其蛋白序列的N末端亦含有鋅指蛋白KRAB亞家族的特征性結構域---KRAB結構域；C末端則含有C2H2型鋅指蛋白家族的特征性結構域---C2H2型鋅指結構域。基于以上各點，故認為本發明的新基因為人鋅指蛋白KRAB亞家族中的新成員，命名為人鋅指蛋白72。并以此推斷其與ZFP41相似，同為鋅指蛋白KRAB亞家族中的成員，并具有相似的生物學功能。該蛋白在生物體內與X染色體特定區域的活性的調節相關，其可從染色體水平調節相關基因的轉錄與表達，該蛋白的表達異常通常與生物體內一些發育紊亂性疾病、相關組織的腫瘤及癌癥等疾病的發生密切相關。其還可用于診斷及治療上述各種疾病。