[發(fā)明專利]一種新的多肽——雌激素磺基轉(zhuǎn)移酶36和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 00111840.4
• 申請日: 2000-03-02
• 公開（公告）號: CN1311306A
• 公開（公告）日: 2001-09-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權(quán)）人: 上海博德基因開發(fā)有限公司
• 主分類號: C12N9/10
• 分類號: C12N9/10;C12N15/54;C12N15/63;C07K16/40;C12Q1/48;C12Q1/68;A61K38/45
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地說，本發(fā)明描述了一種新的多肽——雌激素磺基轉(zhuǎn)移酶36，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發(fā)明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應(yīng)用。

雌激素磺基轉(zhuǎn)移酶是一種胞內(nèi)酶，它催化利用3′-磷酸腺苷-5′-磷酰硫酸作為活化的磺酰基供體的雌激素磺基結(jié)合作用以及雌激素失活作用。研究發(fā)現(xiàn)，在3′-磷酸腺苷-5′-磷酰硫酸作為磺酰基供體存在時，人雌激素磺基轉(zhuǎn)移酶對于雌二醇、孕烯醇酮具有高度的親和力。另外，人雌激素磺基轉(zhuǎn)移酶亦可結(jié)合脫氫異雄甾酮，人雌激素磺基轉(zhuǎn)移酶對于類固醇的結(jié)合僅有低的底物特異性。鼠雌激素磺基轉(zhuǎn)移酶功能結(jié)構(gòu)域的突變會導(dǎo)致其磺基轉(zhuǎn)移功能以及3′-磷酸腺苷-5′-磷酰硫酸依賴的雌激素結(jié)合能力的減落。(Qian?Y,Song?WC；1999)。

雌激素磺基轉(zhuǎn)移酶具有由α-螺旋所圍繞的中心的五線β折疊結(jié)構(gòu)。在其功能結(jié)構(gòu)域上具有底物或3′-磷酸腺苷-5′-磷酰硫酸結(jié)合位點(diǎn)，該位點(diǎn)顯示了關(guān)鍵的保守氨基酸殘基。雌激素磺基轉(zhuǎn)移酶功能結(jié)構(gòu)域上的谷氨酸突變會使酶的活性減低。(Rana?Dajani.,et?al.；1999)。

研究發(fā)現(xiàn)，雌激素磺基轉(zhuǎn)移酶與激素依賴性腫瘤如乳腺癌、乳腺瘤、子宮內(nèi)膜瘤，上皮細(xì)胞腫瘤以及高甘油三酯血癥(HTG)具有密切關(guān)系。(Harada?N.etal.；1999)(Pasqualini?JR,Chetfite?GS.,et?al.；1999)(Lewis?AJ,etal.；1999)

本發(fā)明的多肽與人雌激素磺基轉(zhuǎn)移酶20是同源蛋白，具有雌激素磺基轉(zhuǎn)移酶家族的特征性序列，屬于雌激素磺基轉(zhuǎn)移酶家族，故本發(fā)明的多肽命名為雌激素磺基轉(zhuǎn)移酶36。本發(fā)明的多肽具有雌激素磺基轉(zhuǎn)移酶家族相似的生物學(xué)功能，對于性激素及其相關(guān)激素代謝的調(diào)節(jié)，對于膽固醇代謝的調(diào)節(jié)具有重要作用，并可引起一些相關(guān)疾病的發(fā)生。

由于如上所述雌激素磺基轉(zhuǎn)移酶36蛋白在調(diào)節(jié)細(xì)胞分裂和胚胎發(fā)育等機(jī)體重要功能中起重要作用，而且相信這些調(diào)節(jié)過程中涉及大量的蛋白，因而本領(lǐng)域中一直需要鑒定更多參與這些過程的雌激素磺基轉(zhuǎn)移酶36蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新雌激素磺基轉(zhuǎn)移酶36蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態(tài)下的作用提供了基礎(chǔ)。這種蛋白可能構(gòu)成開發(fā)疾病診斷和/或治療藥的基礎(chǔ)，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發(fā)明的一個目的是提供分離的新的多肽——雌激素磺基轉(zhuǎn)移酶36以及其片段、類似物和衍生物。

本發(fā)明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發(fā)明的另一個目的是提供含有編碼雌激素磺基轉(zhuǎn)移酶36的多核苷酸的重組載體。

本發(fā)明的另一個目的是提供含有編碼雌激素磺基轉(zhuǎn)移酶36的多核苷酸的基因工程化宿主細(xì)胞。

本發(fā)明的另一個目的是提供生產(chǎn)雌激素磺基轉(zhuǎn)移酶36的方法。

本發(fā)明的另一個目的是提供針對本發(fā)明的多肽——雌激素磺基轉(zhuǎn)移酶36的抗體。

本發(fā)明的另一個目的是提供了針對本發(fā)明多肽——雌激素磺基轉(zhuǎn)移酶36的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發(fā)明的另一個目的是提供診斷治療與雌激素磺基轉(zhuǎn)移酶36異常相關(guān)的疾病的方法。

本發(fā)明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO:2氨基酸序列的多肽。

本發(fā)明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補(bǔ)的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少100％相同性的多核苷酸。

更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種：(a)具有SEQ?ID?NO:1中279-1271位的序列；和(b)具有SEQ?ID?NO:1中1-2242位的序列。

本發(fā)明另外涉及一種含有本發(fā)明多核苷酸的載體，特別是表達(dá)載體；一種用該載體遺傳工程化的宿主細(xì)胞，包括轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)或轉(zhuǎn)染的宿主細(xì)胞；一種包括培養(yǎng)所述宿主細(xì)胞和回收表達(dá)產(chǎn)物的制備本發(fā)明多肽的方法。

本發(fā)明還涉及一種能與本發(fā)明多肽特異性結(jié)合的抗體。

本發(fā)明還涉及一種篩選的模擬、激活、拮抗或抑制雌激素磺基轉(zhuǎn)移酶36蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本發(fā)明的多肽。本發(fā)明還涉及用該方法獲得的化合物。