[發明專利]一種新的多肽——人肌強直性營養不良蛋白激酶44和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00111818.8
• 申請日: 2000-03-02
• 公開（公告）號: CN1311313A
• 公開（公告）日: 2001-09-05
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C12N9/12
• 分類號: C12N9/12;C12N15/54;C12N15/63;C07K16/40;C12Q1/48;C12Q1/68;A61K38/45
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本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽--人肌強直性營養不良蛋白激酶44，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

肌強直性營養不良是一種成年人常見的神經肌肉遺傳性疾病。肌強直性營養不良蛋白激酶基因是引起的該病的主要基因，被定位于第十九條染色體的13.3位點。該基因中不穩定的CTG重復片段的異常擴增是引發該疾病的主要原因。在正常情況下，蛋白序列中CTG重復序列應在40個以下；當蛋白中含有40-150個CTG重復片段時，即表現出輕度的疾病癥狀；而當病人蛋白中含有150以上個CTG重復序列片段時，即表現出嚴重的疾病癥狀。因而，該蛋白激酶的表達異常是生物體肌強直性營養不良癥發生的主要原因，該蛋白激酶中CTG序列片段重復的頻率，還與生物體內各種肌肉萎縮、肌肉組織功能異常、肌肉營養不良等疾病的發生密切相關[Gert?Jansen,Dietmar?Bachner?et?al.,1995,Human?MolecularGenetics,4:843-852]。

人們已從鼠及人等多種生物體內克隆得到了多種不同來源的肌強直性營養不良蛋白激酶，并對其結構及功能進行了較為詳細的研究。1993年，ManiS.Mahadevan等人從鼠及人體內分別克隆得到了兩個肌強直性營養不良蛋白激酶，并對兩者的序列片段及其功能進行了比較分析。研究發現，這兩個蛋白的蛋白序列中均含有兩個保守的WD重復序列片段，這一重復序列片段是生物體細胞信號轉導及細胞調控蛋白所共有的高度保守的功能性結構域。這一結構域在生物體內參與多種細胞信號轉導及調控過程，其突變將直接影響蛋白在體內的生物學功能[Mani?S.Mahadevan,Chris?Amemiya?et?al.,1993,Human?MolecularGenetics,2:299-304]。

不同來源的肌強直性營養不良蛋白激酶在生物體的胚胎組織、腦組織、睪丸組織及所有的神經組織中均有表達，而其在端腦及中腦中的表達量明顯高于其它各組織，由此可見，該蛋白激酶不僅是肌肉組織多種疾病的致病基因，其還可能是各種神經系統疾病、內分泌系統疾病及各種睪丸組織疾病的重要致病基因。肌強直性營養不良蛋白激酶在生物體內可能涉及多種重要的細胞信號轉導及調控過程，該蛋白激酶的突變或表達異常通常與生物體內多種發育紊亂性疾病、內分泌系統疾病、神經系統疾病及一些肌肉組織疾病的發生密切相關。

本發明的新的人蛋白與已知的鼠肌強直性營養不良蛋白激酶在蛋白水平上有60％的同一性和71％的相似性，且與該蛋白相似，亦含有各種肌強直性營養不良蛋白激酶所共有的WD重復序列片段，因而，認為其是一種新的人肌強直性營養不良蛋白激酶，命名為人肌強直性營養不良蛋白激酶44，并與已知的鼠肌強直性營養不良蛋白激酶具有相似的生物學功能。該蛋白在生物體內與肌肉萎縮、肌營養不良等多種肌肉組織疾病、神經系統疾病、內分泌系統疾病及相關組織的發育紊亂性疾病的發生密切相關。該蛋白還可用于診斷及治療如上所述的多種疾病。

由于如上所述人肌強直性營養不良蛋白激酶44蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人肌強直性營養不良蛋白激酶44蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人肌強直性營養不良蛋白激酶44蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽--人肌強直性營養不良蛋白激酶44以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人肌強直性營養不良蛋白激酶44的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人肌強直性營養不良蛋白激酶44的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產人肌強直性營養不良蛋白激酶44的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽--人肌強直性營養不良蛋白激酶44的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽--人肌強直性營養不良蛋白激酶44的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與人肌強直性營養不良蛋白激酶44異常相關的疾病的方法。