[發明專利]一種新的多肽——人環管蛋白63和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00111811.0
• 申請日: 2000-03-02
• 公開（公告）號: CN1311211A
• 公開（公告）日: 2001-09-05
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/17;A61K38/16;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
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本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——人環管蛋白63，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

細胞之間的相互通訊聯系在多細胞的有機體中起著及其重要的作用。由于細胞間存在著精細的分工，一些細胞群體有賴于其他細胞群體，并要求其他細胞群體對其產生應答反應。這種精巧的細胞間通訊網絡可以控制細胞的生長、分裂、死亡、分化形成組織以及各種其他的生命過程。

在許多種系生物的精子和卵子發育過程中，發育中的精子或卵子通過環管從其周圍的細胞里得到營養物質。環管的形成與肌動蛋白纖維有關。現在已經知道有一些基因參與環管的組裝和功能，其中一類是含有Kelch結構域的基因家族。Kelch蛋白家族都含有兩個共同的結構，在N末段有BTB/POZ區域，在C末段有kelch重復序列[So1tysik-Espanola?M?et?al,Mol?biol?Cell?1999?Jul]。

現在已經發現的kelch蛋白家族是肌動蛋白結合蛋白，或與肌動蛋白有關。Kelch蛋白家族在環管形成、神經纖維定位、細胞融合、細胞形態形成等在發育過程中與細胞骨架有關的生理過程中起重要作用[Soltysik-espanola?M,Mol?biol?Cell1999；Philips?J,J?Cell?biol?1998；]。例如，在果蠅中，kelch蛋白被定位在環管的內側面，它使環管側面保持緊束的狀態。Kelch蛋白突變會造成卵子周圍的護衛滋養細胞通過環管向卵子輸送胞質這一過程受到阻礙[Xue?F,Cooley?L,Cell?1993Mar?12]。Kel-1蛋白的缺失會導致幼蟲早期的生長停滯[Ohmachi?M,genes?Cells1999]。由于在包括人在內的許多生物的精子、卵子形成過程中都發現了環管結構和具有kelch結構的蛋白，因此可以認為kelch蛋白對精卵形成的作用具有普遍意義。又如在腦內發現的kelch蛋白Mayven可能在腦細胞肌動蛋白細胞骨架的動態組織中起作用[Soltysik-Espanola?M,Mol?Biol?Cell?1999]。

本發明的人的基因與果蠅kelch蛋白在蛋白水平上有75％的同源性，87％的同一性。其與kelch蛋白家族的特征性結構域---kelch結構域非常相似，且含有kelch結構域中的幾個高度保守的氨基酸殘基。基于以上各點，故認為本發明的新基因為一編碼人與kelch蛋白家族kelch結構域相似的基因，命名為人環管蛋白63。并以此推斷其與kelch結構域相似，具有相似的生物學功能。

由于如上所述人環管蛋白63蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人環管蛋白63蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人環管蛋白63蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——人環管蛋白63以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人環管蛋白63的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人環管蛋白63的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產人環管蛋白63的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——人環管蛋白63的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——人環管蛋白63的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與人環管蛋白63異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO:2氨基酸序列的多肽。

本發明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少76％相同性的多核苷酸。

更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種：(a)具有SEQ?ID?NO:1中45-1772位的序列；和(b)具有SEQ?ID?NO:1中1-2873位的序列。