[發明專利]一種新的多肽——人蛋白激酶TAK1－27和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00111810.2
• 申請日: 2000-03-02
• 公開（公告）號: CN1311312A
• 公開（公告）日: 2001-09-05
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C12N9/12
• 分類號: C12N9/12;C12N15/54;C12N15/63;C07K16/40;C12Q1/48;C12Q1/68;A61K38/45
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本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——人蛋白激酶TAK1-27，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

細胞通訊是指一個細胞發出的信息通過介質傳遞到另一個細胞產生相應的反應。細胞間的通訊對于多細胞生物體的發生和組織的構建，協調細胞的功能，控制細胞的生長和分裂是必須的。

細胞以三種方式進行通訊：(1)細胞通過分泌化學信號進行相互通訊；(2)細胞間直接接觸，通過與質膜結合的信號分子影響其它細胞；(3)細胞間形成間隙連接使細胞質相互溝通，通過交換小分子來調節代謝反應。其中，細胞通過分泌化學信號進行細胞間通訊的過程包括6個基本步驟：(1)化學信號分子的合成；(2)信號細胞釋放化學信號分子；(3)信號分子轉運至靶細胞；(4)識別信號分子，通常是通過特異性受體識別；(5)信息的跨膜傳遞；(6)生物學效應。其中，細胞的化學信號分子又可分為親脂性和親水性兩類：(1)親脂性信號分子，主要代表是甾類激素和甲狀腺素，可穿過細胞質膜進入細胞，與細胞質或細胞核中受體結合形成復合物；(2)親水性信號分子，包括神經遞質、生長因子、局部化學遞質和大多數激素，他們不能穿過靶細胞質膜，而是通過與細胞表面受體結合，再經信號轉換機制，在細胞內產生第二信使跨膜傳遞信息。

TAK1是一種老鼠的蛋白質激酶。它通過將信號分子磷酸化來參與并且調節轉化生長β因子(TGF-β)的轉錄。進一步研究表明，TAK1的蛋白質激酶活性由TGF-β和骨骼形態發生蛋白激活。這表明TAK1的功能是TGF-β超家族成員信號通路的調節蛋白[Kyoko?Yamaguchi,Kyoko?Shiakabe?et.al.,Science270(5244),2008-2011(1995)]。

TAK1基因編碼579個氨基酸的蛋白質。TAK1蛋白的基本序列包含了一個有蛋白質激酶催化功能域的N端和一個大約300個氨基酸殘基的C端結構域。TAK1蛋白的N端催化功能域包含有一個共有序列，該序列與蛋白質激酶RAF-1和MEKK1的亞結構域相對應[S.K.Hanks,A.M.Quinn,T.Hunter,Science241,42(1988)]。TAK1蛋白N端催化功能域與RAF-1和MEKK1的催化功能域有30％的一致性[T.I.Bonner?et?al.,Nucleic?Acids?Res.14,1009(1986)][C.A.Lange-Carter,C.M.Pleiman,A.M.Gardner,K.J.Blumer,G.L.Johnon,Science260,315(1993)]。TAK1蛋白的C末端300個氨基酸的下游序列與其它蛋白質激酶沒有明顯的相似性。TAK1蛋白N末端起始22個氨基酸中的11個氨基酸殘基是絲氨酸或蘇氨酸殘基磷酸化后，可能起著召集信號分子或參與限制激酶活性的催化活動。

通過Northernblot實驗表明，TAK1?mRNA幾乎存在與所有的組織和器官，尤其是在胸腺和大腦中含量很豐富，而在肝中含量相對較少。

本發明的人的基因與蛋白激酶TAK1家族中的成員在蛋白水平上有50％的同一性及71％的相似性。且兩者的蛋白序列均含有蛋白激酶TAK1家族的特征性重復序列。基于以上各點，故認為本發明的新基因為人蛋白激酶TAK1家族的新成員，命名為人蛋白激酶TAK1-27。并以此推斷其與人蛋白激酶TAK1相似，同為人蛋白激酶家族的成員，并具有相似的生物學功能。

由于如上所述人蛋白激酶TAK1-27蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人蛋白激酶TAK1-27蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人蛋白激酶TAK1-27蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——人蛋白激酶TAK1-27以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人蛋白激酶TAK1-27的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人蛋白激酶TAK1-27的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產人蛋白激酶TAK1-27的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——人蛋白激酶TAK1-27的抗體。