[發(fā)明專利]一種新的多肽——蛋白激酶31和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 00111623.1
• 申請日: 2000-01-28
• 公開（公告）號: CN1307119A
• 公開（公告）日: 2001-08-08
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權(quán)）人: 上海博道基因技術(shù)有限公司
• 主分類號: C12N9/12
• 分類號: C12N9/12;C12N15/54;C12N15/63;C07K16/40;C12Q1/48;C12Q1/68;A61K38/45
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本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地說，本發(fā)明描述了一種新的多肽——蛋白激酶31，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發(fā)明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應(yīng)用。

自真核生物中鑒別的一類最大的已知蛋白超家族由蛋白激酶組成(這兒使用超家族以區(qū)別于較小??較為密切相關(guān)通常已被歸為一個家族的亞型)，該家族成員都有一段保守的催化核心，蛋白絲氨酸/蘇氨酸激酶以及蛋白酪氨酸激酶的保守催化核心相同。這些酶利用ATP(或GTP)的γ-磷酸酯以生成磷酸單酯，并把蛋白(絲氨酸及蘇氨酸上)的乙醇基團與/或蛋白(酪氨酸上)的酚基作為磷酸酯受體。真核生物蛋白激酶可分為四大類：1)ACG類，包括環(huán)核苷酸依賴家族(PKA與PKG)，蛋白激酶C(PKC)家族，β-腎上腺素能受體激酶(βARK)家族，核糖體S6激酶家族及其他密切相關(guān)的；2)CaMK類，包括由鈣/鈣調(diào)蛋白調(diào)控的蛋白激酶家族，Snf1/AMPK家族，及其他密切相關(guān)的；3)CMGC類，包括細胞周期蛋白依賴激酶，Erk(MAP)激酶家族，糖原合成酶3(GSK3)家族，酪蛋白激酶II家族，Clk(類似Cdk的激酶)家族，及其他密切相關(guān)的；4)‘保守的’蛋白酪氨酸激酶(PTK)類。該超家族又可分為兩個主要的亞門：蛋白絲氨酸/蘇氨酸激酶以及蛋白酪氨酸激酶。

真核生物蛋白激酶的激酶功能域傳遞催化活性。蛋白激酶因其同源激酶功能域(亦被稱為催化功能域)而相關(guān)，該區(qū)域有250-300個氨基酸殘基。激酶功能域的作用可分為三類：1)結(jié)合并定向作為具有二價陽離子(通常是Mg²⁺或Mn²⁺)復(fù)合物的ATP(或GTP)磷酸酯供體；2)結(jié)合并定向蛋白(或肽)底物；以及3)轉(zhuǎn)移ATP(或GTP)的γ-磷酸酯至蛋白底物的受體羥基殘基(絲氨酸，蘇氨酸，或酪氨酸)。激酶功能域被進一步分為12個更小的亞功能域，并定義為從未被大的氨基酸插入打斷并含有保守殘基特征序列模式的區(qū)域。有十二個功能域殘基因在超家族中被視為是恒定不變的，而明顯意味其在酶功能中具有重要作用，在亞功能域VIB，VIII，及IX中發(fā)現(xiàn)的氨基酸殘基特征序列模式在不同蛋白激酶家族的各成員中尤為高度保守。激酶功能域的同源性意味著它們都折疊成拓撲結(jié)構(gòu)相似的3維核心結(jié)構(gòu)并根據(jù)一個普遍的機制傳遞磷酸轉(zhuǎn)移。

蛋白激酶催化核心結(jié)構(gòu)的一般拓撲結(jié)構(gòu)可以PKA-Cα類蛋白激酶位代表。PKA-Cα類蛋白激酶的激酶功能域折疊成兩部分結(jié)構(gòu)。較小的一部分，NH₂-端部分，含有亞結(jié)構(gòu)域I-IV，主要參與核苷酸固定兼定向。這一部分具有顯著反向平行的β-片層結(jié)構(gòu)，這在核苷酸結(jié)合的蛋白質(zhì)中是較為獨特的。較大的COOH-端部分，含有亞結(jié)構(gòu)域VIA-XI，主要對結(jié)合肽底物及啟動磷酸轉(zhuǎn)移起作用，其內(nèi)含物是顯著的α-螺旋。亞結(jié)構(gòu)域V殘基有兩片。兩片中間較深的裂縫作為催化位點被識別。