[發明專利]一種新的多肽——人ATP依賴的解螺旋酶31和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00111601.0
• 申請日: 2000-01-28
• 公開（公告）號: CN1319661A
• 公開（公告）日: 2001-10-31
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博道基因技術有限公司
• 主分類號: C12N9/22
• 分類號: C12N9/22;C12N15/55;C12N15/63;C07K16/40;C12Q1/34;C12Q1/68;A61K38/46
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本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽--人ATP依賴的解螺旋酶31，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

在生物體內存在一類蛋白，它們在真核及原核生物中均有相似的結構特征。這些蛋白在生物體內的作用是ATP依賴的，這類蛋白在生物體內的分布非常廣泛，在各種生物中均發現有該蛋白的存在，其構成了一很大的蛋白家族，即ATP依賴的解螺旋酶超家族。

在細胞的眾多活動中，RNA結構的調控如：前體RNA的剪接、剪接體的裝配、蛋白翻譯等都是必需的調節步驟。這些過程通常由各種不同的解螺旋酶來調節完成。解螺旋酶在很多RNA起重要作用的生物系統中均可檢測到。它們廣泛地分布于從原核生物(包括病毒)到低等及高等生物的各組織器官中，參與細胞核及線粒體的分裂、RNA的編輯、rRNA的加工、轉錄起始、細胞核mRNA的轉運及mRNA的降解等過程。解螺旋酶被認為是細胞發育及分化過程中的重要因子，其中的一些還在病毒單鏈RNA的轉錄及復制過程中起作用[Arri?Eisen,John?C.Lucchesi,Bioessays,1998,20:634-641]。其在生物體內為癌癥、神經系統疾病及免疫系統疾病的診斷、預防及治療提供了有效的手段。

研究發現，ATP依賴的解螺旋酶超家族的成員含有多個保守的序列基序，其中一些是該家族的成員所特異的；而另一些不僅在該家族成員中存在，且在一些ATP結合蛋白中亦存在。這些序列基序中的一個為“D-E-A-D盒”，存在于ATP結合蛋白的B基序中。該解螺旋酶超家族中的另一些成員含有一“D-E-A-H盒”，該盒由一組氨酸殘基替換了“D-E-A-D盒”中的天冬酰胺殘基，該盒結構基序是解螺旋酶超家族所特異的。

“D-E-A-D盒”及“D-E-A-H盒”均存在于ATP依賴的解螺旋酶的B結構基序中，所有該家族成員的B結構基序均含有如下所示的一致性序列片段：[LIVMF](2)-D-E-A-D-[RKEN]-X-[LIVMFYGSTN]；該序列片段是調節ATP水解與否的關鍵位點，該基序的突變將導致ATP水解的抑制，從而影響酶發揮正常的生理學功能。ATP依賴的解螺旋酶是細胞發育及分化過程中的重要調節因子，其在生物體內通常與一些神經系統疾病、免疫系統疾病、腫瘤及癌癥等疾病的發生相關。

本發明的新的人ATP依賴的解螺旋酶亦含有一“D-E-A-D盒”結構，其為人DEAD/DEAH盒ATP依賴的解螺旋酶家族的新成員，且與該家族的其它成員相似，具有類似的生理學功能。該蛋白在生物體內調節著各種細胞的發育及分化過程。該蛋白的表達異常通常與生物體內一些相關的神經系統疾病、免疫系統疾病及相關組織的腫瘤及癌癥的發生密切相關。

由于如上所述人ATP依賴的解螺旋酶31蛋白在機體內重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人ATP依賴的解螺旋酶31蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人ATP依賴的解螺旋酶31蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽--人ATP依賴的解螺旋酶31以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人ATP依賴的解螺旋酶31的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人ATP依賴的解螺旋酶31的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產人ATP依賴的解螺旋酶31的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽--人ATP依賴的解螺旋酶31的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽--人ATP依賴的解螺旋酶31的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與人ATP依賴的解螺旋酶31異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO:2氨基酸序列的多肽。

本發明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；