[發明專利]一種新的多肽——鋅指結構域52和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00111572.3
• 申請日: 2000-01-28
• 公開（公告）號: CN1306987A
• 公開（公告）日: 2001-08-08
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博道基因技術有限公司
• 主分類號: C07K14/00
• 分類號: C07K14/00;C07K14/435;C07K16/00;C07K16/18;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/16;A61K38/17;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽--鋅指結構域52，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

鋅指結構域是核酸結合蛋白的結構，在許多核酸結合蛋白中發現含有該結構域。一個鋅指結構域由25至30個氨基酸殘基構成。C2H2鋅指是典型的鋅指結構域。其中兩個保守的半胱氨酸及組氨酸都位于結構域的端部，與一個鋅離子配位，其保守的序列模板為：#-X-C-X(1-5)-C-X3-#-X5-#-X2-H-X(3-6)-[H/C],X代表任何氨基酸殘基，#-代表那些對于鋅指穩定折疊較為重要的殘基。C2H2鋅指由兩條短的β鏈后接一個α螺旋構成。螺旋的N-端部分與結合鋅指的DNA主溝結合。這樣一個結構域約和5個核苷酸相互作用。在C2H2型鋅指蛋白ZID(帶有作用域的鋅指蛋白)，Ttk,GAGA,ZF5以及一組痘病毒蛋白的氨基酸末端有一段保守的特征序列模板，這一區域被稱為POZ(痘病毒及鋅指)域或是BTB域。ZID,Ttk以及GAGA的POZ域抑制其與DNA相關的指區域的相互作用。這種抑制作用不依賴與和其他蛋白的相互作用，也不依賴于POZ域及指區域之間的特異性作用。

BTB(BR-C,ttk及bab)或是POZ(痘病毒及鋅指)域是一種保守的蛋白-蛋白作用特征序列模板，存在于部分鋅指(zf-C2H2)轉錄因子以及與肌動蛋白相關的含有Kelch特征序列模板的蛋白與痘病毒蛋白的N-端附近。許多轉錄因子通過抑制基因轉錄而行使其功能。它們自然補充輔助蛋白的能力對于抑制基因表達是至關重要的。BTB蛋白是這類轉錄調節因子中的一種，它通過控制染色質構象介導基因表達。BTB域具有轉錄抑制活性，它把蛋白導向核的細孔狀模式，并與組蛋白脫乙酰酶復合物的組分相互作用。BTB域和組蛋白脫乙酰酶復合物相連提供了連接轉錄因子與調節染色質構象酶活性的機制。BTB域具有典型的專性同型二聚體特征：互相緊密盤繞的同型二聚體，并具有延伸的疏水接觸面，約有四分之一的單體表面涉及二聚體分子間接觸。二聚體接觸面上有一道暴露于表面的溝，其上排列有保守的氨基酸序列，這是BTB域與核輔抑制因子或其他核蛋白的作用位點。BTB/POZ域介導同數基因或異數基因的二聚化。二聚化的BTB/POZ域由互相緊密盤繞的同型二聚體構成。該蛋白的中心支架通過側面被位于分子頂端及底部的短β片層包圍的一簇α螺旋構成。鋅指蛋白的POZ域介導轉錄阻抑并與組蛋白脫乙酰酶輔阻遏物復合物相互作用。

人的LAZ3/BCL6基因編碼具有六個羧基端類似Kruppel的鋅指以及一個BTB/POZ域，該基因編碼的蛋白具有轉錄因子的功能，BTB/POZ域在介導該活性中起到主要作用，它是一個自主的轉錄阻遏域，如果缺失BTB/POZ域，將會大大減少LAZ3/BCL6的轉錄因子抑制功能，倘若該基因發生突變或是重排，則會引起彌散性大細胞淋巴瘤。

本發明的多肽含有BTB域以及C2H2型鋅指結構，該多肽及其抑制劑拮抗劑激動劑可用于診斷防治與轉錄因子突變有關的癌腫或疾病，例如早幼粒細胞白血病，彌散性大細胞淋巴瘤等。

由于如上所述鋅指結構域52蛋白在機體內重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的鋅指結構域52蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新鋅指結構域52蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽--鋅指結構域52以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼鋅指結構域52的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼鋅指結構域52的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產鋅指結構域52的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽--鋅指結構域52的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽--鋅指結構域52的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與鋅指結構域52異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO:2氨基酸序列的多肽。

本發明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：