[發(fā)明專利]一種新的多肽——F－盒結構蛋白52和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 00111548.0
• 申請日: 2000-01-26
• 公開（公告）號: CN1306985A
• 公開（公告）日: 2001-08-08
• 發(fā)明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博道基因技術有限公司
• 主分類號: C07K14/00
• 分類號: C07K14/00;C07K14/435;C07K16/00;C07K16/18;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/16;A61K38/17;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P31/00;A61P31/18
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• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明屬于生物技術領域，具體地說，本發(fā)明描述了一種新的多肽--F-盒結構蛋白52，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發(fā)明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

細胞增殖是細胞通過細胞周期，完成細胞分裂而使細胞數量不斷增加的生命現象。細胞周期是細胞由一次分裂的中期到下一次分裂的中期的經歷，分為G₁,S,G₂和M期。細胞周期井然有序的進行，是靠cdc基因增殖相關基因有序的表達，以及檢驗點的嚴格監(jiān)視和調控來保證的。現已確定，由p34^cdc2(或p33^cdk2)以及多種細胞周期蛋白的表達結合分離磷酸化與去磷酸化成為驅動細胞周期運轉的引擎，最終導致細胞分裂。

細胞周期蛋白根據其序列的相似及生理功能而分為幾類，脊椎動物中有細胞周期蛋白C?D?E?F等多種。酵母及人類中同源的SKP1基因被認為是cdc4突變體及細胞周期蛋白F-結合蛋白的抑制因子。Skp1p通過Skp2p直接與細胞周期蛋白A/Cdk2結合，并通過一個被稱為F-盒的結構模板與Skp2p，周期蛋白F，以及Cdc4p直接結合。泛素介導的Cin2p,Clb5p及Cdk抑制因子Sic1p的蛋白酶解需要SKP1,SKP1還把這些分子與蛋白酶解機制聯系起來。許多蛋白中含有F-盒模板，從而參與泛素途徑。不同的skp1突變體在G1或G2期滯留細胞，表明在循環(huán)的不同階段中，蛋白酶解調節(jié)之間相互關聯。

細胞周期蛋白F,Cdc4p以及Skp2p蛋白中都具有F-盒模板結構，該模板是一段保守的結構序列，是結合Skp1p的區(qū)域，它把Skp1p與許多蛋白結合起來。F-盒蛋白是對SCF泛素-連接酶復合物補充磷酸化底物的受體，它直接與泛素化底物接觸，不同的F-盒蛋白能夠選擇性識別各種泛素化目標。F-盒蛋白介導分解的所有目標都是細胞的主要事件中關鍵的調控因子，這些主要事件包括DNA復制，細胞周期進程以及營養(yǎng)辨別。有些病毒蛋白中也含有F-盒結構模板，這些病毒通過超量產生F-盒抑制類似周期蛋白等的蛋白特異性亞基的降解，從而加強其復制能力或啟動特異性抑制蛋白的降解。

本發(fā)明的多肽中含有F-盒結構模板，該多肽及其抑制劑拮抗劑激動劑可用于診斷及防治與細胞調控因子紊亂相關的疾病，以及防治含有F-盒結構模板的病毒感染。

由于如上所述F-盒結構蛋白52蛋白在機體內重要功能中起重要作用，而且相信這些調節(jié)過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的F-盒結構蛋白52蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新F-盒結構蛋白52蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態(tài)下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發(fā)疾病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發(fā)明的一個目的是提供分離的新的多肽--F-盒結構蛋白52以及其片段、類似物和衍生物。

本發(fā)明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發(fā)明的另一個目的是提供含有編碼F-盒結構蛋白52的多核苷酸的重組載體。

本發(fā)明的另一個目的是提供含有編碼F-盒結構蛋白52的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發(fā)明的另一個目的是提供生產F-盒結構蛋白52的方法。

本發(fā)明的另一個目的是提供針對本發(fā)明的多肽--F-盒結構蛋白52的抗體。

本發(fā)明的另一個目的是提供了針對本發(fā)明多肽--F-盒結構蛋白52的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發(fā)明的另一個目的是提供診斷治療與F-盒結構蛋白52異常相關的疾病的方法。

本發(fā)明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO:2氨基酸序列的多肽。

本發(fā)明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種：(a)具有SEQ?ID?NO:1中31-1446位的序列；和(b)具有SEQ?ID?NO：1中1-2393位的序列。

本發(fā)明另外涉及一種含有本發(fā)明多核苷酸的載體，特別是表達載體；一種用該載體遺傳工程化的宿主細胞，包括轉化、轉導或轉染的宿主細胞；一種包括培養(yǎng)所述宿主細胞和回收表達產物的制備本發(fā)明多肽的方法。