[發(fā)明專利]一種新的多肽——RNA結(jié)合蛋白48和編碼這種多肽的多核苷酸

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 00111547.2
• 申請(qǐng)日: 2000-01-26
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN1306984A
• 公開(kāi)（公告）日: 2001-08-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 毛裕民;謝毅
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海博道基因技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): C07K14/00
• 分類號(hào): C07K14/00;C07K14/435;C07K16/00;C07K16/18;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/16;A61K38/17;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
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本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地說(shuō)，本發(fā)明描述了一種新的多肽--RNA結(jié)合蛋白48，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發(fā)明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應(yīng)用。

在生物體內(nèi)，生命遺傳信息首先從DNA傳遞到RNA，然后再進(jìn)一步傳遞到蛋白質(zhì)，在這一過(guò)程中RNA起著至關(guān)重要的信息傳遞作用。在所有細(xì)胞中，參與蛋白質(zhì)合成的RNA根據(jù)功能的不同可分為三大類型：mRNA、rRNA和tRNA；另外還有一些其它RNA，它們之中某些在DNA合成過(guò)程中作為引物起作用，某些作為核酸酶的組成部分。許多RNA并不能直接產(chǎn)生作用，而是需要經(jīng)過(guò)復(fù)雜的加工處理過(guò)程才能成為有活性的、能發(fā)揮作用的RNA，因此在生物體內(nèi)存在許多能識(shí)別RNA的蛋白質(zhì)，依靠這些蛋白質(zhì)來(lái)完成RNA的識(shí)別、結(jié)合以及加工過(guò)程。

許多真核的蛋白能夠與單鏈RNA相結(jié)合，這些蛋白包含了一個(gè)或多個(gè)拷貝的RNA結(jié)合區(qū)域，每個(gè)拷貝單位約含90個(gè)氨基酸。RNA結(jié)合蛋白家族包含數(shù)目較多的蛋白，一般可分為三類：異源核蛋白、小核蛋白以及RNA前體和mRNA結(jié)合蛋白；另外，也有其它一些蛋白含有這種結(jié)構(gòu)。真核RNA結(jié)合區(qū)域RNP有兩個(gè)高度保守的區(qū)域，其一是包含六個(gè)氨基酸殘基的疏水性片段(稱RNP-2?motif)；另一個(gè)是八肽的MOTIF(稱RNP-1或RNP-CS)，這個(gè)部分是整個(gè)區(qū)域中最為保守的部分。根據(jù)序列分析顯示，典型的真核RNA結(jié)合區(qū)域RNP-1通常由8個(gè)氨基酸組成。其中包含的芳香族氨基酸殘基與RNA在堿基之間的插入有關(guān)，而附近的帶正電的殘基便于相應(yīng)的帶負(fù)電的核酸磷酸鹽骨架的靠近和結(jié)合。

與RNA加工有關(guān)的許多蛋白質(zhì)之間的交互作用在細(xì)胞的代謝過(guò)程中起著重要的作用，而RNA結(jié)合區(qū)域?qū)τ诟哂H合力的RNA結(jié)合有重要意義。如異源核蛋白(hnRNP)非常顯著的功能就是異源RNA的包裝改造，這與mRNA的拼接直接相關(guān)，mRNA前體首先折疊成易于被剪切的結(jié)構(gòu)，然后進(jìn)行一系列的加工改造，從而形成所需要的mRNA；真核蛋白合成啟動(dòng)因子4B(eIF-4B)是核內(nèi)mRNA與核糖體相結(jié)合的必要因子。由于RNA結(jié)合蛋白的異常表達(dá)常常會(huì)引起mRNA及其它RNA的異常，從而導(dǎo)致人、脊椎動(dòng)物等許多物種在遺傳上的不穩(wěn)定。

由于如上所述RNA結(jié)合蛋白48蛋白在機(jī)體內(nèi)重要功能中起重要作用，而且相信這些調(diào)節(jié)過(guò)程中涉及大量的蛋白，因而本領(lǐng)域中一直需要鑒定更多參與這些過(guò)程的RNA結(jié)合蛋白48蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新RNA結(jié)合蛋白48蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態(tài)下的作用提供了基礎(chǔ)。這種蛋白可能構(gòu)成開(kāi)發(fā)疾病診斷和/或治療藥的基礎(chǔ)，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發(fā)明的一個(gè)目的是提供分離的新的多肽--RNA結(jié)合蛋白48以及其片段、類似物和衍生物。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供含有編碼RNA結(jié)合蛋白48的多核苷酸的重組載體。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供含有編碼RNA結(jié)合蛋白48的多核苷酸的基因工程化宿主細(xì)胞。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供生產(chǎn)RNA結(jié)合蛋白48的方法。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供針對(duì)本發(fā)明的多肽--RNA結(jié)合蛋白48的抗體。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供了針對(duì)本發(fā)明多肽--RNA結(jié)合蛋白48的模擬化合物、拮抗劑、激動(dòng)劑、抑制劑。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供診斷治療與RNA結(jié)合蛋白48異常相關(guān)的疾病的方法。

本發(fā)明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO:2氨基酸序列的多肽。

本發(fā)明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補(bǔ)的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種：(a)具有SEQ?ID?NO:1中51-1364位的序列；和(b)具有SEQ?ID?NO:1中1-3029位的序列。

本發(fā)明另外涉及一種含有本發(fā)明多核苷酸的載體，特別是表達(dá)載體；一種用該載體遺傳工程化的宿主細(xì)胞，包括轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)或轉(zhuǎn)染的宿主細(xì)胞；一種包括培養(yǎng)所述宿主細(xì)胞和回收表達(dá)產(chǎn)物的制備本發(fā)明多肽的方法。

本發(fā)明還涉及一種能與本發(fā)明多肽特異性結(jié)合的抗體。