[發明專利]一種新的多肽——脂蛋白7,87和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00111504.9
• 申請日: 2000-01-26
• 公開（公告）號: CN1306974A
• 公開（公告）日: 2001-08-08
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博道基因技術有限公司
• 主分類號: C07K14/00
• 分類號: C07K14/00;C07K14/435;C07K16/00;C07K16/18;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/16;A61K38/17;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——脂蛋白7,87，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

粘附素脂蛋白家族由支原體himinis中p50及不同的與粘附有關的抗原蛋白構成。

支原體himinis是一種與人類尿生殖疾病，肺炎，以及膿毒性關節炎相關的支原體。粘附素是一種介導粘附于其他細胞或是到周圍表面或是到底物上的脂蛋白。Vaa是支原體himinis中的一種粘附素，Vaa抗原是一種50Kda的表面脂蛋白，它具有四個串聯且重復的DNA序列，位于中心區域，編碼一個周期性多肽結構，其N端及重復區域含有高度保守的序列，而在C端域作為粘附介導組件卻變化各異，這可能與各類菌株把不同單克隆抗體與Vaa產物結合有關。Vaa抗原在與支原體himinis感染有關的慢性，活動性關節炎中表達，在人體宿主中是高度免疫原型的。菌株大小不同以及Vaa的C端免疫原性不同會影響支原體himinis的粘附性以及失去抗體介導的免疫性，從而導致人體宿主中的器官產生適應能力。

p50也是支原體hominis的粘附素，是一種50-KDa的脂蛋白，具有A,B及C三種重復，該序列模板幾乎占據整個蛋白的四分之三，在其原有環境中可能是一種191-Kda的四聚體，呈螺旋結構并有一個亮氨酸鋅指。p50的特異性單克隆抗體抗原決定部位位于蛋白的中間以及C端，且不同的單克隆抗體都結合于相同的三個折疊，重復的氨基酸序列模板區域，這些重復域高度同源但在結構上不盡相同，可被單克隆抗體區別。

本發明的多肽，脂蛋白7也是粘附素脂蛋白家族成員，大小為50Kd。與Vaa及p50一樣，介導粘附作用，其特異性單克隆抗體抗原決定部位同樣位于蛋白的中間以及C端，具有高度同源的重復域，但在結構上不盡相同，可被單克隆抗體區別。脂蛋白7及其拮抗劑，抑制劑，激動劑可用于診斷，防治與支原體himinis感染有關的疾病，例如慢性，活動性關節炎等。

由于如上所述脂蛋白7,87蛋白在機體內重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的脂蛋白7,87蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新脂蛋白7,87蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——脂蛋白7,87以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼脂蛋白7,87的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼脂蛋白7,87的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產脂蛋白7,87的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——脂蛋白7,87的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——脂蛋白7,87的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與脂蛋白7,87異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO:2氨基酸序列的多肽。

本發明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種：(a)具有SEQ?ID?NO:1中260-2641位的序列；和(b)具有SEQ?ID?NO:1中1-2775位的序列。

本發明另外涉及一種含有本發明多核苷酸的載體，特別是表達載體；一種用該載體遺傳工程化的宿主細胞，包括轉化、轉導或轉染的宿主細胞；一種包括培養所述宿主細胞和回收表達產物的制備本發明多肽的方法。

本發明還涉及一種能與本發明多肽特異性結合的抗體。

本發明還涉及一種篩選的模擬、激活、拮抗或抑制脂蛋白7,87蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本發明的多肽。本發明還涉及用該方法獲得的化合物。