[發(fā)明專利]一種新的多肽——人鋅指蛋白13和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 00111477.8
• 申請日: 2000-01-21
• 公開（公告）號: CN1307013A
• 公開（公告）日: 2001-08-08
• 發(fā)明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博道基因技術有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/17;A61K38/16;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
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本發(fā)明屬于生物技術領域，具體地說，本發(fā)明描述了一種新的多肽——人鋅指蛋白13，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發(fā)明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

真核基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控對于基因的正常表達及發(fā)揮正常生物學功能是十分重要的，通常由轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子來完成這一調(diào)節(jié)過程。轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子在生物體內(nèi)參與決定基因在何種組織及何種發(fā)育階段開始轉(zhuǎn)錄，編碼這類蛋白的基因如發(fā)生突變，不但該基因自身不能正常表達，而且受其調(diào)節(jié)的許多基因也不能正常的進行轉(zhuǎn)錄與表達。轉(zhuǎn)錄因子對基因表達的調(diào)控主要通過轉(zhuǎn)錄因子與特定的DNA序列結(jié)合、轉(zhuǎn)錄因子間的相互作用及轉(zhuǎn)錄因子與常規(guī)轉(zhuǎn)錄機構的相互作用在完成。根據(jù)結(jié)構基序的不同，已知的DNA結(jié)合蛋白可主要分為兩類：含有螺旋-轉(zhuǎn)角-螺旋基序的蛋白及鋅指蛋白[Kamal?Chowdhury，Heidi?Rohdewohld?et?al.，Nucleic?AcidsResearch，1988，16：9995-10011]。

鋅指蛋白為編碼鋅離子介導的核苷酸結(jié)合蛋白多基因家族中的成員，鋅指蛋白的鋅指結(jié)構主要有以下幾種：C2H2構型、C2C2構型、C2HC構型、C2HC4C構型、C3H構型、C3HC4構型(Dai?KS?et?al.，1998)。人們已從酵母、果蠅、鼠及人等多種生物體中分離得到了各種構型的鋅指蛋白，其中含C2H2構型的鋅指蛋白基因構成人類基因組最大的一族基因(Berker?et?al.，1995)。C2H2型鋅指蛋白與基因的轉(zhuǎn)錄活化及抑制有關，這些蛋白的表達異常將引發(fā)各種發(fā)育紊亂性疾病、各種腫瘤的發(fā)生、各種遺傳性疾病及免疫系統(tǒng)疾病[KamalChowdhury，Heidi?Rohdewohld?et?al.，Nucleic?Acids?Research，1988，16：9995-10011]。

所有的C2H2型鋅指蛋白均含有28-30個氨基酸長的保守的指重復序列(F/Y)XCXXCXXXFXXXXXLXXHXXXHTGEKP，其中一些特定的氨基酸殘基位點為高度保守的。這一序列在很多不同的鋅指蛋白中均含有多個拷貝，其拷貝數(shù)不同(鋅指個數(shù)不同)則功能也不同。鋅指蛋白與不同長度的DNA的結(jié)合依賴于指結(jié)構的數(shù)量，多指結(jié)構可能與復合物的結(jié)合穩(wěn)定性有關，而復合物是RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄的作用位點。研究發(fā)現(xiàn)，許多鋅指蛋白的鋅指結(jié)構域相互連接區(qū)域也是高度保守的，這一區(qū)域通常含有下列序列：His-Thr-Gly-Gly-Lys-Pro-(Tyr，Phe)-X-Cys，其中組氨酸與半胱氨酸為金屬離子的結(jié)合位點，而X為可變氨基酸殘基。這一區(qū)域?qū)τ阡\指結(jié)構的形成是必需的，指結(jié)構的數(shù)量將直接影響鋅指蛋白與不同長度的DNA結(jié)合，且多指結(jié)構與轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)復合物的結(jié)合穩(wěn)定性有關[Jeremy?M.Berg，Annu.Rev.Biophys.Chem，1990，19：405-421]。

C2H2型鋅指蛋白按其不同的結(jié)構特征又可分為不同的蛋白家族，Kruppel相關的鋅指蛋白就是其中分布最廣的一種。其蛋白序列中亦含有如上所述的C2H2型鋅指蛋白的特征性結(jié)構基序，且在生物體內(nèi)有著與之相似的生理學功能。其在生物體內(nèi)通過調(diào)控各組織基因的表達來調(diào)節(jié)細胞的分裂與發(fā)育[Jeremy?M.Berg，Annu.Rev.Biophys.Chem，1990，19：405-421]。

本發(fā)明的新的人鋅指蛋白與已知的人鋅指蛋白ZNF11B在蛋白水平上有50％的同一性和61％的相似性，因而兩者同為人C2H2型鋅指蛋白Kruppel家族的成員，并具有相似的生物學功能。人鋅指蛋白ZNF11B定位于第10條染色體上，其在生物體內(nèi)與一些基因、基因組的復制及染色體的重排等過程相關[Tunnacliffe?A，Liu?L?et?al.，1993，Nucleic?Acids?Res，21：1409-1417]。本發(fā)明的新的人鋅指蛋白與ZNFIIS蛋白相似，亦在生物體內(nèi)調(diào)控著一些基因及基因組的復制及染色體重排過程，該蛋白的表達異常將導致一些基因的異常增殖，從而引發(fā)一些相關組織的發(fā)育紊亂癥、相關組織的腫瘤及癌癥等。該蛋白可用于診斷及治療相關組織的腫瘤及癌癥、發(fā)育紊亂性疾病、血液系統(tǒng)疾病及神經(jīng)系統(tǒng)疾病等。