[發明專利]生產L－賴氨酸的棒狀菌和制備L－賴氨酸的方法

有效

• 申請號: 00109840.3
• 申請日: 2000-07-07
• 公開（公告）號: CN1280184A
• 公開（公告）日: 2001-01-17
• 發明（設計）人: 貝蒂娜·默克爾;瓦爾特·普費弗勒;卡羅琳·克羅伊策;斯特凡·漢斯;梅希特希爾德·里平;洛塔爾·埃格林;赫爾曼·扎姆;米羅斯拉夫·帕特克
• 申請（專利權）人: 德古薩－于爾斯股份公司;于利希研究中心有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P13/08;C12P19/34
• 代理公司: 永新專利商標代理有限公司
• 代理人: 林曉紅

1．生產L-賴氨酸的棒狀菌，其具有擴增的lysE基因，在這些菌株中，選自包括dapA基因，lysC基因，pyc基因和dapB基因的組的附加基因分別或一起得到擴增，尤其是超量表達。

2．如權利要求1中所要求的棒狀菌，其中dapB基因得到擴增，尤其是超量表達。

3．如權利要求1中所要求的棒狀菌，其中額外含有SEQ?ID?NO．1所示的dapB基因翻譯起點上游的5′末端的dapB基因是擴增的，尤其是超量表達的。

4．如權利要求1中所要求的棒狀菌，其含有SEQ?ID?No．5和SEQID?No．6中所示的dapA啟動子的MC20或MA16突變。

5．優選地為重組的DNA，其來源于棒狀菌，并且能夠在棒狀菌中復制，該DNA至少含有SEQ?ID?No．1中所示的額外編碼dapB基因翻譯區上游的5’末端的核苷酸序列。

6．如權利要求5中所要求的能夠復制的DNA，其具有SEQ?ID?No．1中所示的核苷酸序列。

7．如權利要求1中所要求的棒狀菌，其中dapA基因和1ysC基因是擴增的，尤其是超量表達的。

8．一種通過發酵具有擴增的lysE基因的棒狀菌制備L-賴氨酸的方法，其中使用這樣的細菌，其編碼選自包括dapA，lysC，pyc和dapB的組的基因的核苷酸序列分別或一起得到擴增，尤其是超量表達。

9．如權利要求8的方法，其中使用這樣的細菌，其dapA基因和lysC同時得到擴增，尤其是超量表達。

10．如權利要求8的方法，其中使用這樣的細菌，其dapA基因和dapB基因同時得到擴增，尤其是超量表達。

11．如權利要求8的方法，其中使用由一種或多種質粒載體轉化的菌株，所說的質粒載體攜帶有待擴增的基因的核苷酸序列。

12．如權利要求9的方法，其中使用由一種質粒載體轉化的菌株，所說的質粒載體攜帶有編碼選自包括dapA，lysC和lysE基因的核苷酸序列。

13．如權利要求11的方法，其中使用由一種或多種質粒載體轉化的菌株，所說的質粒載體分別或一起攜帶編碼dapA，lysC，pyc和lysE基因的核苷酸序列。

14．如前述一或多項權利要求所要求的方法，其中使用谷氨酸棒桿菌的細菌。

15．如前述一或多項權利要求所要求的通過發酵制備L-賴氨酸的方法，該方法包括以下步驟：

a)發酵L-賴氨酸生產菌，在這些細菌中，所描述的基因得到了擴增，

b)在培養基中或在細菌細胞中富集L-賴氨酸，和

c)分離L-賴氨酸。

16．大腸桿菌K-12菌株DH5α／pEC7lysE，保藏號為DSM12871。

17．大腸桿菌K-12菌株DH5α／pEC7dapBlysE，保藏號為DSM12875。

18．谷氨酸棒桿菌菌株DSM5715／pJC23，保藏號為DSM12869。

19．谷氨酸棒桿菌菌株DSM5715aecD::dapA(MA16)，保藏號為DSM12867。

20．谷氨酸棒桿菌菌株DSM5715aecD::dapA(MC20)，保藏號為DSM12868。

21．谷氨酸棒桿菌DM678菌株，保藏號為DSM12866。