[發明專利]一種生產纖維素酶的方法

無效

• 申請號: 00107965.4
• 申請日: 2000-06-02
• 公開（公告）號: CN1327051A
• 公開（公告）日: 2001-12-19
• 發明（設計）人: 夏黎明;代淑梅;岑沛霖;劉建軍;李秋圓;劉榮新
• 申請（專利權）人: 唐山市冀東溶劑廠
• 主分類號: C12N9/42
• 分類號: C12N9/42;C12N1/14;//;C12R1885)
• 代理公司: 唐山專利事務所
• 代理人: 王永紅

本發明涉及一種生產纖維素酶的方法，特別涉及一種用木糖渣生產纖維素酶的方法。

目前，國內外纖維素酶的生產方法普遍采用液體深層發酵，用于產酶的碳源一般是純纖維素或紙漿，生產工藝復雜，成本較高，而且環境污染嚴重。

本發明的目的就在于克服現有技術中的不足之處，提供一種工藝簡單，成本低，無污染，利用木糖渣加菌種發酵培養生產纖維素酶的方法。

本發明的目的是這樣實現的，它包括以下步驟：

a.選取菌種，在30-32℃的溫度條件下，放入試管中培養7-10天，然后放入三角瓶中在30-32℃的溫度條件下再培養7-10天，最后將菌種放入種子罐中攪拌培養，菌種在種子罐中的攪拌培養時間為24小時，溫度為36±2℃；

b.將2％木糖渣、0.5‰營養鹽、0.05‰微量元素、種子罐中培養的菌種放入5M³發酵罐中攪拌發酵培養，發酵培養時間48小時，溫度36±2℃，PH值＝6.0，攪拌速度為120轉/分；

c.將攪拌發酵后的發酵液進行壓濾，濾布目數為664，壓濾速度為4噸/小時；

d.將壓濾后的物料進一步超濾濃縮，使酶液濃度濃縮10-15倍；

e.超濾濃縮后添加5％的甘油保護劑制成液體纖維素酶制劑，噴霧干燥后制成粉劑；

本發明的目也可以通過以下技術措施來實現，所選菌種為浙大實驗室生產的Trichodermarcesei?Rut?C30，噴霧干燥溫度為180℃，時間為0.1-8.5秒，營養鹽為硫酸氨或硫酸鎂、磷酸二氧鉀，微量元素為硫酸亞鐵、氯化亞鈷。

相比現有技術，本發明具有以下優點：

1.生產工藝簡單，操作實施方便；

2.原料來源廣泛，可利用木糖渣、玉米秸桿、玉米棒芯做原料；

3.生產成本低，無污染；

4.產品性能穩定，酶活力(FPA)可達5-12IU/ml；

下面結合實施例詳述本發明，首先選取菌種，在30-32℃的溫度條件下，放入試管中培養7-10天，然后放入三角瓶中在30-32℃的溫度條件下再培養7-10天，最后將菌種放入種子罐中攪拌培養，菌種在種子罐中的攪拌培養時間為24小時，溫度為36±2℃。將2％木糖渣、0.5‰營養鹽、0.05‰微量元素、種子罐中培養的菌種放入5M³發酵罐中攪拌發酵培養，發酵培養時間48小時，溫度36±2℃，PH值＝6.0，攪拌速度為120轉/分。將攪拌發酵后的發酵液進行壓濾，濾布目數為664，壓濾速度為4噸/小時。將壓濾后的物料進一步超濾濃縮，使酶液濃度濃縮10-15倍。超濾濃縮后添加5％的甘油保護劑制成液體纖維素酶制劑，噴霧干燥后制成粉劑。所選菌種為浙大實驗室生產的Trichodermarcesei?Rut?C30，酶活力高，性能穩定，抗雜菌能力強，制粉劑的噴霧干燥溫度為180℃，時間為0.1-8.5秒，營養鹽為硫酸氨或硫酸鎂、磷酸二氧鉀，微量元素為硫酸亞鐵、氯化亞鈷。本發明生產工藝簡單，操作實施方便，原料來源廣泛，可利用木糖渣、玉米秸桿、玉米棒芯做原料，生產成本低，無污染；產品性能穩定，酶活力(FPA)可達5-12IU/ml；并且省去了通常的原料預處理工序，適宜于規模化工業生產，是一種理想的纖維素酶的生產方法。