[發(fā)明專利]2－甲基喹喔啉的微生物轉化

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 00106543.2
• 申請日: 2000-02-12
• 公開（公告）號: CN1273276A
• 公開（公告）日: 2000-11-15
• 發(fā)明（設計）人: 邁克爾·P·伯恩斯;詹姆斯·J·考利;約翰·W·王
• 申請（專利權）人: 輝瑞產(chǎn)品公司
• 主分類號: C12P17/12
• 分類號: C12P17/12;C07D241/44;//;C12R165)
• 代理公司: 柳沈知識產(chǎn)權律師事務所
• 代理人: 巫肖南

本發(fā)明涉及制備2-喹喔啉羧酸的方法，更具體地說，涉及微生物氧化2-甲基喹喔啉制備2-喹喔啉羧酸。

用微生物氧化特定芳香族雜環(huán)的方法對于本領域技術人員是已知的，更具體地說，微生物氧化特定芳香族雜環(huán)的上的甲基，例如，下述兩篇文獻中描述的那些：“Gene?Order?of?the?TOL?Catabolic?Plasmid?UpperPathway?Operon?and?Oxidation?of?Both?Toluene?and?Benzyl?Alcohol?by?thexy1A?Product，”由S.Harayama等人.，J.Bacteriol.，167(2)：455-461(1986)報道和“芳香族雜環(huán)上的甲基基團的酶促氧化：一種用于制備雜環(huán)芳香族羧酸的通用方法，”由A.Keiner，Angew.Chem.Int.Ed.Engl.，31(6)：774-775(1992)報道。

美國專利US4,859,592公開了一種用于制備吡啶甲酸的微生物學方法，然后這種物質(zhì)可通過化學手段被轉化成為吡啶產(chǎn)物。

美國專利US5,104,798；5,213,973和US5,236,832公開了一種微生物方法，該方法使用甲苯、二甲苯或甲基·異丙基苯作為誘導劑，在一種甲單孢菌微生物的作用下，將特定的芳香族5員或6員雜環(huán)化合物中的甲基氧化成為相應的羧酸。正如其中公開的那樣，利用保藏號為ATCC?NO.33015惡臭甲單孢菌株將甲苯中的甲基氧化為苯甲酸，其中包括用甲苯單加氧酶、乙醇脫氫酶以及乙醛脫氫酶分別催化的3個步驟，這些內(nèi)容是本領域已知的。

如上述Harayama等人的上述文獻中此前公開的內(nèi)容，惡臭甲單孢菌mt-2的TOL質(zhì)粒pWWO是一種可傳遞的染色體外因子，它可以編碼甲苯、m-二甲苯和p-二甲苯等幾種芳香烴氧化代謝所需的全部酶。帶有TOL質(zhì)粒的細菌，例如保藏號為ATCC?NO.33015惡臭甲單孢菌能夠將特定的芳香烴轉化為對應的芳香族羧酸：編碼二甲苯降解的酶的xy1操縱子和負責xy1基因調(diào)控的基因都位于TOL質(zhì)粒pWWO上。TOL質(zhì)粒pWWO上編碼上述氧化所需酶的基因，必須被誘導產(chǎn)生這類酶。因此，上述美國專利US5,213,973、US5,104,798和US5,236,832中都描述了這種誘導。

如文獻Gaucher等人在Dev.Ind.Microbiol.，22：219-232(1981)中描述的那樣，真菌灰棕黃青霉包含用于將間-甲酚轉化為間-羥基苯甲酸所需的3種酶：間-甲酚甲基羥化酶、間-羥苯甲醇脫氫酶和間-羥苯醛羥化酶。

在此重申，正如本領域技術人員已知的那樣，某些真菌和細菌含有能將芳香環(huán)上甲基氧化成為其對應羧酸的酶。盡管已知能通過使用微生物將這類芳香雜環(huán)上甲基氧化成其對應羧酸時，但如本領域技術人員認識到的，通常這類微生物氧化的化學產(chǎn)量和光學產(chǎn)量隨以下因素而有實質(zhì)性變化，例如，選定的具體微生物、底物濃度、底物結構等。

現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)一系列微生物，包括真菌和細菌，基本上能將2-甲基喹喔啉氧化成為2-喹喔啉羧酸。此外，所述方法還能保證2-喹喔啉羧酸的適當回收。

1998年2月5日提交的美國臨時專利申請?zhí)枮镹O.60/073801(“‘801申請’)的申請，即1999年1月18日提交的國際PCT申請?zhí)朠CT/IB99/00067，公開了2-喹喔啉羧酸作為合成新型二羥基己酸的中間產(chǎn)物的用途，二羥基己酸能夠用于治療，例如炎癥以及其他免疫紊亂。本發(fā)明的新方法所提供的2-喹喔啉羧酸能夠用于合成這類二羥基己酸。

本發(fā)明中引用的所有文獻，包括上述文獻，在此全文引入作為參考。

本發(fā)明涉及一種從2-甲基喹喔啉制備2-喹喔啉羧酸的微生物方法。

更具體地說，本發(fā)明涉及制備通式I所示化合物的微生物學方法，該方法包括：通過把通式II所示化合物與一種微生物接觸，然后在適當條件下溫育得到的混合物從而制備出一定量通式I所示化合物，所述微生物能實現(xiàn)將通式II所示化合物中的甲基氧化成為通式I所示化合物中的羧基基團。

因此，本發(fā)明提供了用于實施通式II所示化合物2-甲基喹喔啉的微生物氧化的方法，該方法包括：

將通式II所示化合物與一種微生物或其突變體接觸從而實現(xiàn)本發(fā)明所述的氧化(“它的一種合適的突變體”)，所述微生物或其突變體為相關領域技術人員已知或能通過這樣的突變制備出，以及

在足以產(chǎn)生一定量通式I所示化合物2-喹喔啉羧酸的條件下溫育得到的混合物，