[發明專利]蝦青素合成酶

有效

• 申請號: 00103755.2
• 申請日: 2000-03-08
• 公開（公告）號: CN1266101A
• 公開（公告）日: 2000-09-13
• 發明（設計）人: 端野立夫;小島一之;世戶口豐
• 申請（專利權）人: 霍夫曼－拉羅奇有限公司
• 主分類號: C12N15/52
• 分類號: C12N15/52;C12N1/16;C12N9/00;C12N15/63;C12P23/00
• 代理公司: 柳沈知識產權律師事務所
• 代理人: 巫肖南

1.一種分離的DNA，所述DNA含有編碼一種酶的核苷酸序列，所述的酶具有優選在P.rhodozyma中催化β胡蘿卜素到蝦青素的反應的蝦青素合成酶的活性。

2.根據權利要求1的分離的DNA，它的特征是(a)所說的核苷酸序列編碼具有SEQ?ID?NO：1所示的氨基酸序列的所說的酶，或

(b)所說的核苷酸序列編碼選自(i)等位基因變體或(ii)具有一個或多個氨基酸的添加、插入、缺失和/或取代但仍然具有相同類型的酶活性的酶的所說酶的變體。

3.根據權利要求1的分離的DNA，其特征在于所說的核苷酸序列是：

(i)SEQ?ID?NO：2中表示的核苷酸序列；

(ii)由于遺傳密碼的簡并性，編碼具有與所述核苷酸序列(i)編碼的相同的氨基酸序列的蝦青素合成酶的核苷酸序列；和

(iii)在標準雜交條件下，與來自(i)或(ii)的所述核苷酸序列的互補序列雜交的核苷酸序列。

4.根據權利要求1的分離的DNA，其特征在于所說的核苷酸序列是：

(i)SEQ?ID?NO：3中表示的核苷酸序列；

(ii)由于遺傳密碼的簡并性，編碼具有與所述核苷酸序列(i)編碼的相同的氨基酸序列的蝦青素合成酶的核苷酸序列；和

(iii)在標準雜交條件下，與來自(i)或(ii)的核苷酸序列的互補序列雜交的核苷酸序列。

5.一種載體或質粒，所述的載體或質粒含有如權利要求1到4的任何一個所要求保護的分離的DNA。

6.一種宿主細胞，所述的宿主細胞是由如權利要求1到4的任何一個所要求保護的分離的DNA或如權利要求5要求保護的載體或質粒轉化或轉染的。

7.一種多肽，所述多肽是由如權利要求1到4的任何一個要求保護的分離的DNA編碼的。

8.一種用于生產具有蝦青素合成酶活性的多肽的方法，該方法包括在指導所說的酶的生產的條件下，培養如權利要求5中要求保護的轉化的宿主細胞。

9.一種用于生物生產蝦青素的方法，該方法包括向合適的宿主生物體中導入一個或多個如權利要求1到4的任何一個要求保護的分離的DNA，在指導生產蝦青素的條件下培養所獲得的生物體，并且從培養物中回收蝦青素。

10.一種用于生產蝦青素的方法，該方法包括在含有合適的再構成膜的合適的反應混合物中，在有合適的電子供體存在下，將β胡蘿卜素與具有蝦青素合成酶活性的多肽接觸。

11.根據權利要求10的方法，其中所述的多肽以再構成膜的形式存在，而所述再構成膜是從生物膜、如微粒體或線粒體膜制備的。

12.根據權利要求10的方法，其中所述的多肽的再構成的人工膜、如脂質體的形式存在。

13.根據權利要求10的方法，其中所說的電子供體是可以還原其反應中心的合適的電子供體、如細胞色素P450還原酶。