技術領域

本發明涉及一種抗植物病毒的復配增效組合物，具體涉及一種香椿樹皮提取物與寧南霉素的復配增效組合物，屬于生物農藥技術領域。?

背景技術

煙草花葉病毒(Tobacco?mosaic?virus,?TMV)是一種普遍發生的植物病毒，可侵染65個科885多種植物，有寄主范圍廣、抗逆性強、生產危害大等特點，據報道，全世界每年僅由煙草花葉病毒病(TMV)項危害造成的經濟損失約達1億多美元。由于植物病毒屬于絕對寄主，自身無能量代謝系統，對寄主植物細胞具有高度依賴性，對其防治目前還沒有非常有效的防治方法。已有研究表明，從植物中篩選抗病毒物質是開發植物病毒抑制劑的重要途徑之一。

寧南霉素是一種胞嘧啶核苷肽型新抗生素，具有高效、低毒、無“三致”和無蓄積的廣譜殺菌劑，對水稻白葉枯病、小麥、蔬菜等白粉病及煙草花葉病毒具有明顯的防治和增產、增值效果。

香椿樹皮來源于楝科植物香椿(Toona?sinensis)的樹皮，香椿皮苦澀、涼，具有除熱、燥濕、止血、殺蟲等功效。現代藥理學研究表明，香椿屬植物具有抗菌、抗癌、降血脂、降血糖、抗氧化等作用。2008年，本課題組對香椿在農業上的應用進行了研究，發現香椿粗提取物對煙草花葉病毒具有較好的抑制作用，并將粗提取物與寧南霉素以質量比1:1進行復配，發現其對TMV的抑制活性有增強作用。很多植物中產生的抗病毒活性物質具有環境兼容性好、安全和開發成本低等優點，但是單一的植物活性成分藥效一般不能達到理想效果，將其與其他農藥復配可以適當提高藥效，減少化學藥劑對人類和環境的危害，也可減緩植物病毒抗藥性的產生。

現有技術中公開了復配增效組合物，包含香椿粗提取物與寧南霉素的制劑。可參見申請號200810069089.1，該專利的全文引入本文作為參考。

發明內容

本發明的目的在原有專利(一種抗植物病毒的藥物及配制方法，申請號200810069089.1)香椿粗提取物與寧南霉素復配的基礎上，進一步對香椿粗提物進行分離提取，發現具有抗病毒活性較好的組分，開發了新的不同配比的組合物。

本發明通過活性跟蹤法對香椿抗病毒物質進行分離，通過復配試驗，發現復配組合物能夠產生料想不到的增效效果。

本發明所述一種抗植物病毒的復配增效組合物，包括申請專利號200810069089.1所述的由香椿樹皮乙醇浸膏，加少量水，在超聲儀中分散，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取，所得的各種萃取液，減壓濃縮得到相應浸膏，其特征在于乙酸乙酯萃取浸膏或正丁醇萃取浸膏與寧南霉素復配，質量比0.5～8:2時，抗植物病毒活性在相同濃度下高于單獨乙酸乙酯萃取浸膏或正丁醇萃取浸膏，質量比為1:2時，高于寧南霉素；乙酸乙酯萃取浸膏經柱層析分離，分離物Fr1的抗植物病毒活性在相同濃度下比乙酸乙酯萃取浸膏大幅度提高，Fr1與寧南霉素復配質量配比1:1～4時，抗植物病毒活性在相同濃度下，高于單獨Fr1或寧南霉素；正丁醇萃取浸膏經柱層析分離，分離物Fr11、Fr13的抗植物病毒活性在相同濃度下比正丁醇萃取浸膏大幅度提高，Fr11或Fr13與寧南霉素復配質量配比1:1～3時，抗植物病毒活性在相同濃度下，高于單獨Fr11、Fr13或寧南霉素。

本發明所述的乙酸乙酯萃取浸膏柱層析分離物Fr1是指將乙酸乙酯萃取浸膏用乙酸乙酯溶解，200～300目硅膠拌樣，用200～300目硅膠裝柱，進行柱層析分離，以石油醚/乙酸乙酯=1:1～10(V:V)的洗脫液梯度洗脫，用TLC點板跟蹤，收集相同極性的洗脫液，得Fr1到Fr8??8個組分，Fr1是第一份洗脫液減壓濃縮后得到的產物；所述的正丁醇萃取浸膏柱層析分離物Fr11?、Fr13是指將正丁醇浸膏用含10%甲醇的水溶液溶解，經D101大孔吸附樹脂吸附，靜置過夜，然后用甲醇與水配制的洗脫劑：甲醇、80%甲醇水溶液、60%甲醇水溶液、40%甲醇水溶液、20%甲醇水溶液及純水6種洗脫液進行梯度洗脫，以洗脫液的顏色接近無色為止，收集相同極性的洗脫液，得到6個組分Fr9到Fr14，其中Fr11和Fr13是其第三組分和第五組分洗脫液減壓濃縮后得到的產物。

本發明所述的的一種抗植物病毒的組合物，其特征是組合物的原料為香椿樹皮乙醇浸膏的乙酸乙酯萃取浸膏、乙酸乙酯萃取浸膏的柱層析分離物Fr1、香椿乙醇浸膏的正丁醇萃取浸膏、正丁醇萃取浸膏的柱層析分離物Fr11和Fr13和寧南霉素，復配增效組合物的最佳質量配比為：

乙酸乙酯萃取浸膏:寧南霉素等于1:2，

正丁醇萃取浸膏:寧南霉素等于1:2，