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[其他]由原生質(zhì)體再生稻株的方法無效

專利信息
申請?zhí)枺?/td> 86103448 申請日: 1986-05-21
公開(公告)號: CN86103448B 公開(公告)日: 1988-06-29
發(fā)明(設(shè)計)人: 藤村達人;櫻井基;赤木宏守;根岸友子;広瀨晃 申請(專利權(quán))人: 三井東壓化學(xué)株式會社
主分類號: C12N5/00 分類號: C12N5/00
代理公司: 中國專利代理有限公司 代理人: 羅宏
地址: 日本*** 國省代碼: 暫無信息
權(quán)利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要: 由原生質(zhì)體生成完全的水稻植株的方法。為得到此原生質(zhì)體,由稻種的坯、盾片或坯根衍生出愈傷組織,在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)愈傷組織以形成易放出原生質(zhì)體的細胞團。用原生質(zhì)體釋放酶溶液處理細胞團以得到原生質(zhì)體。然后將原生質(zhì)體培養(yǎng)成愈傷組織,再在分化培養(yǎng)基中培養(yǎng)此愈傷組織,再生出整株稻。
搜索關(guān)鍵詞: 原生 質(zhì)體 再生 方法
【主權(quán)項】:
1.一種形成水稻植株的方法,其特征在于包括下述步驟:第一步是在MS、B5,N6或R2瓊脂培養(yǎng)基中培養(yǎng)水稻種子的胚、盾片或胚根,再由水稻種子的胚、盾片或胚根衍生出第一個愈傷組織,而其中每種培養(yǎng)基中含有(1)0.01-1%(重)的酵母抽提物,0.01-1%(重)的麥芽汁,0.01-1%(重)的酪蛋白水解物,或5-20%(重)的馬鈴薯抽提物,(2)0.1-10mg/l的2,4-D,以及(3)0-5mg/l的芐基腺嘌呤0-5mg/l的激動素,第二步是將第一個愈傷組織在R2,N6或MS培養(yǎng)基中培養(yǎng)成易釋放出原生質(zhì)體的細胞團,而其中每種培養(yǎng)基中含有(1)0.1-1%(重)的酵母抽提物,0.1-1%(重)的麥芽汁,0.1-1%(重)的酪蛋白水解物,或5-20%(重)的馬鈴薯抽提物,(2)0.1-10mg/1的2,4-D以及(3)0-5mg/l的芐基腺嘌呤或0-5mg/l的激動素,培養(yǎng)基中的細胞濃度為0.3-3%(重),第三步是用釋放原生質(zhì)體的酶溶液處理細胞團以釋放出原生質(zhì)體,而所述的酶溶液含有0.1-10%(重)的纖維素酶,0.1-5%(重)的浸解酶,0-5%(重)的氯化鈣,0-5%(重)的葡聚糖硫酸酯的鉀鹽,以及3-15%(重)甘露糖醇,第四步是在條件培養(yǎng)基中培養(yǎng)所述的原生質(zhì)體,以培養(yǎng)出第二個愈傷組織,而所述的條件培養(yǎng)基是由第二步所用的培養(yǎng)基得到,并且放在含有滲壓劑的親水支持體層上,親水支持體層上條件培養(yǎng)基的厚度為200-300μm,第五步是將所述的第二個愈傷組織在分化培養(yǎng)基中培養(yǎng),以再生出水稻植株,而所述的培養(yǎng)基是MS培養(yǎng)基,它含有0.1-1%(重)的酵母抽提物,0.1-1%(重)的麥芽汁,0.1-1%(重)的酪蛋白水解物或5-20%(重)的馬鈴薯抽提物,(2)0-5mg/l的芐基腺嘌呤或0-5mg/l的激動素。
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