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[其他]制備魚生長激素的方法無效

專利信息
申請號: 85103198 申請日: 1985-04-25
公開(公告)號: CN85103198B 公開(公告)日: 1988-03-16
發明(設計)人: 川內浩司;山口和夫;白幡公勝 申請(專利權)人: 協和發酵工業株式會社
主分類號: A61K37/36 分類號: A61K37/36
代理公司: 中國專利代理有限公司 代理人: 羅宏,劉元金
地址: 日本東京*** 國省代碼: 暫無信息
權利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要: 從屬于鮭鱒亞目的魚的魚腦下線得到提純的抽提物,而提供了魚生長激素;這個激素是一種多肽,具有如下的理化性質(1)氨基酸組成如表示1所示;(II)在N-端上33個氨基酸的順序和在C-端上23個氨基酸的順序如說明書和權利要求中定義的。(III)分子量大約22,000;(IV)等電點5.6-5.7;(V)可溶于堿性水溶液中,難溶或不溶中性和酸性水溶液。
搜索關鍵詞: 制備 魚生 激素 方法
【主權項】:
1.制備一種新穎的魚生長激素的方法,該魚生長激素屬于一種促進魚生長的多肽,并且具有下列理化性質:纈纈纈(I)氨基酸的組成:氨基酸鮭魚的生長激素天冬氨酸28.0蘇氨酸6.8絲氨酸112.7谷氨酸22.5脯氨酸3.7甘氨酸7.3丙氨酸6.6半胱氨酸3.3纈氨酸10.7蛋氨酸2.7異亮氨酸10.6亮氨酸28.6酪氨酸6.8苯丙氨酸6.8色氨酸1.0組氨酸4.2賴氨酸12.6精氨酸8.6其中全部數值均以每摩爾的氨基酸殘基數計,而將每摩爾色氨酸的殘基數定為1與各值比較,(II)在N-端的33個氨基酸和在C-端的23個氨基酸的順序如下:N-端:H2N-異亮氨酸-谷氨酸-天冬酰胺-谷氨酰胺-精氨酸-亮氨酸-苯丙氨酸-天冬酰胺-異亮氨酸-丙氨酸-纈氨酸-絲氨酸-精氨酸-纈氨酸-谷氨酰胺-組氨酸-亮氨酸-組氨酸-亮氨酸-亮氨酸-丙氨酸-谷氨酰胺-賴氨酸-蛋氨酸-苯丙氨酸-天冬酰胺-天冬氨酸-苯丙氨酸-天冬氨酸-甘氨酸-蘇氨酸-亮氨酸-亮氨酸-C-端:-蛋氨酸-組氨酸-賴氨酸-纈氨酸-谷氨酸-蘇氨酸-酪氨酸-亮氨酸-蘇氨酸-纈氨酸-丙氨酸-賴氨酸-半胱氨酸-精氨酸-賴氨酸-絲氨酸-亮氨酸-谷氨酸-丙氨酸-天冬酰胺-半胱氨酸-蘇氨酸-亮氨酸-OH;(III)分子量:大約22,000;(IV)等電點:5.6-5.7;以及(V)可溶于堿性水溶液且難溶于或不溶于中性和酸性水溶液,該方法的特征在于用丙酮提取大馬哈魚的腦下腺,該提取法包括下列步驟:—將35%濃鹽酸和丙酮(10∶90~90∶10)的混合溶液加到腦下腺中,并用勻漿器在500~2000轉/分下使腦下腺勻漿5~10分鐘,—加入同樣的鹽酸和丙酮的混合溶液進行攪拌,并將該混合物在-5到5℃的冷卻條件下離心10~60分鐘,—移去上清液并且將50~90%的含水丙酮加入沉淀物中,—在冷卻條件下攪拌后離心該混合物,—將得到的沉淀用水懸浮,并用飽和的氫氧化鈣水溶液將該懸浮液的pH值調至9-11之間,—在冷卻條件下攪拌后離心該懸浮液,—使上清液對水透析并凍干得到粉末,—用水懸浮該粉末,并用NaOH水溶液將該懸浮液的pH值調至5~7之間。—用離心分離除去不溶性物質,并用鹽酸將上清液的pH值調至5~6之間,—用離心分離回收生成的沉淀物,—將沉淀物溶解于醋酸銨的水溶液(pH8-10,0.05-0.5M)中,并進行葡聚糖凝膠層析,—用同樣的醋酸銨水溶液進行平衡和洗脫,—合并活性組分并且凍干得到白色粉末,—將該白色粉末進行高壓液相層析作為最后純化,以及—合并活性組分并且凍干以得到白色粉末狀的生長激素。
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