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[發(fā)明專利]一種深層液態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)桑黃胞外多糖的方法有效

專利信息
申請(qǐng)?zhí)枺?/td> 201410337721.1 申請(qǐng)日: 2014-07-15
公開(公告)號(hào): CN104087632A 公開(公告)日: 2014-10-08
發(fā)明(設(shè)計(jì))人: 王文風(fēng);徐國(guó)華;徐玲;王英燕;張芙蓉;楊亞威;高巖;許正宏 申請(qǐng)(專利權(quán))人: 江蘇神華藥業(yè)有限公司
主分類號(hào): C12P19/04 分類號(hào): C12P19/04;C08B37/00;C12R1/645
代理公司: 南京天華專利代理有限責(zé)任公司 32218 代理人: 徐冬濤;傅婷婷
地址: 211600 江蘇*** 國(guó)省代碼: 江蘇;32
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摘要:
搜索關(guān)鍵詞: 一種 深層 液態(tài) 發(fā)酵 生產(chǎn) 桑黃胞外 多糖 方法
【權(quán)利要求書】:

1.一種制備桑黃發(fā)酵液的方法,其特征在于將桑黃種子培養(yǎng)液接入滅菌后的發(fā)酵培養(yǎng)基,接種量為10~20%(v/v),通風(fēng)比為1:0.5‐1.5vvm,罐壓0.02~0.05Mpa,在22~30℃下發(fā)酵培養(yǎng)3~5天,得到桑黃發(fā)酵液;其中所述的發(fā)酵培養(yǎng)基配方為:葡萄糖1-3%、淀粉1-3%、酵母粉0.2-1%、蛋白胨0.5-2%、磷酸二氫鉀0.1-0.5%、七水硫酸鎂0.1-0.5%、硫酸銅0.1-0.5%、消泡劑0.01-0.05%、20000u/ml的耐高溫α-淀粉酶0.001-0.007%(v/v),調(diào)節(jié)pH值6.5-7.5。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備桑黃發(fā)酵液的方法,其特征在于所述的桑黃種子培養(yǎng)液通過以下方法制備得到:

1)一級(jí)種子培養(yǎng):將經(jīng)活化搖瓶菌種接入滅菌后的液體種子培養(yǎng)基,接種量為0.1~2%(v/v),通風(fēng)比為1:0.5‐1.5vvm,罐壓0.02~0.05Mpa,在22~30℃下培養(yǎng)4~7天,得到桑黃一級(jí)種子培養(yǎng)液;

2)二級(jí)種子培養(yǎng):將步驟1)所得的一級(jí)種子培養(yǎng)液接入滅菌后的液體種子培養(yǎng)基,接種量為10~20%(v/v),通風(fēng)比為1:0.5‐1.5vvm,罐壓0.02~0.05Mpa,在22~30℃下培養(yǎng)3~4天,得到所述的桑黃種子培養(yǎng)液。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種制備桑黃發(fā)酵液方法,其特征在于所述的液體種子培養(yǎng)基配方為:葡萄糖2-4%、蠶蛹粉0.1-0.5%、黃豆餅粉1-3%、磷酸二氫鉀0.1-0.5%、七水硫酸鎂0.1-0.5%、硫酸銅0.1-0.5%、消泡劑0.01-0.05%,調(diào)節(jié)pH值6.5-7.5。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種制備桑黃發(fā)酵液方法,其特征在于所述的發(fā)酵培養(yǎng)終點(diǎn)為:菌球變碎、濾液渾濁,有特有的濃郁香味;還原糖降至最低并略有波動(dòng),還原糖控制0.3%以下;鏡檢菌絲細(xì)碎,無雜菌污染。

5.一種桑黃胞外多糖提取的方法,其特征在于該方法包括下述步驟:

1)分離:將權(quán)利要求1所得的桑黃發(fā)酵液經(jīng)離心分離,得到桑黃上清液;

2)濃縮:將步驟1)所得的濾液進(jìn)行采用二級(jí)低溫濃縮,得到濃縮比重為1.25~1.40的濃縮漿;

3)醇沉、烘干:加入濃縮漿重量3-5倍量的95%酒精,用酒精計(jì)檢測(cè)混合液酒精度約65-80%(v/v),靜置8-16h,將沉淀物進(jìn)行真空烘干,溫度50‐75℃,真空度不低于0.085MPa;烘干至干燥物水分含量為3~8%(g/100g),即得胞外糖。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的桑黃胞外糖的方法,其特征在于所述步驟1)中所述的離心分離采用臥螺離心機(jī)進(jìn)行,轉(zhuǎn)速控制在2500‐3500r/min。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的桑黃胞外糖的方法,其特征在于所述步驟2)中所采用的二級(jí)濃縮為:一級(jí)采用雙效蒸發(fā)器濃縮,將發(fā)酵液濃縮到比重為1.15‐1.20,二級(jí)采用單效濃縮器濃縮,即將比重為1.1‐1.20的濃縮液繼續(xù)濃縮到比重為1.25~1.40的濃縮漿;濃縮過程均要求控制溫度不高于75℃,真空度不低于0.085MPa。

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