技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種具有抗腫瘤和免疫增強(qiáng)活性的阿魏酰低聚糖及其制備方法和用途，屬于天然藥物領(lǐng)域。

背景技術(shù)

阿魏酰低聚糖(FOs)是一類廣泛存在于禾本科植物中的不同糖鏈位置上的羥基與阿魏酸(FA)羧基酯化形成的功能性低聚糖。FOs具有阿魏?；c親水性的低聚糖基團(tuán)，兼具水溶性和耐熱性。目前的研究主要集中在其制備方法及抗氧化的生物活性上，由于FOs具有較強(qiáng)的抗氧化性和生物活性，其抗氧化活性強(qiáng)于阿魏酸及膳食纖維，對Fe²⁺、H₂O₂和羥自由基具有較強(qiáng)的清除能力，F(xiàn)Os還具有抑制金黃色葡萄球菌的生長、增殖雙歧桿菌和對蛋白非酶糖基化反應(yīng)具有抑制作用等功能，因而，F(xiàn)Os在保健食品和醫(yī)藥工業(yè)中具有廣闊的應(yīng)用前景，但其體內(nèi)生物活性有待深入研究，低聚糖的生物活性與其結(jié)構(gòu)有著密切的關(guān)系，F(xiàn)Os組分及聚合度對抗腫瘤活性及免疫增強(qiáng)活性的影響未見報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

有鑒于此，提供一種具有抗腫瘤和免疫增強(qiáng)活性的阿魏酰低聚糖及其制備方法和用途實(shí)為必要。

一種具有抗腫瘤和免疫增強(qiáng)活性的阿魏酰低聚糖，由以下方法制得：

(1)配置培養(yǎng)基：向60g/L麥麩液中添加10g/L木聚糖和1g/L蛋白胨；

(2)發(fā)酵培養(yǎng)基：利用該培養(yǎng)基進(jìn)行液態(tài)發(fā)酵，控制起始發(fā)酵pH4.0、起始溫度33℃，在發(fā)酵至36h時(shí)，將pH和溫度分別調(diào)控為6.0和29℃，發(fā)酵至84h，制得阿魏酰低聚糖。

上述阿魏酰低聚糖由聚合度分別為6、5、4，由分子量分別為1118、986、854的阿魏酰阿拉伯糖基木六糖(FAX6)、阿魏酰阿拉伯糖基木五糖(FAX5)、阿魏酰阿拉伯糖基木四糖(FAX4)構(gòu)成。

上述具有抗腫瘤和免疫增強(qiáng)活性的阿魏酰低聚糖在制備抗腫瘤藥物中增強(qiáng)免疫保健品中的用途。

本發(fā)明提供一種制備阿魏酰低聚糖的方法，由其制得的阿魏酰低聚糖具有抗腫瘤活性及免疫增強(qiáng)活性，將阿魏酰低聚糖在保健食品及醫(yī)藥中的應(yīng)用變?yōu)楝F(xiàn)實(shí)，同時(shí)也提升了麥麩利用的附加值。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步說明

制備具有抗腫瘤和免疫增強(qiáng)活性的阿魏酰低聚糖，具體方法為：向60g/L麥麩液中添加10g/L木聚糖和1g/L蛋白胨制得培養(yǎng)基；利用該培養(yǎng)基進(jìn)行液態(tài)發(fā)酵，控制起始發(fā)酵pH4.0、起始溫度33℃，在發(fā)酵至36h時(shí)，將pH和溫度分別調(diào)控為6.0和29℃，發(fā)酵至84h，制得阿魏酰低聚糖。

經(jīng)液相色譜及氣相色譜分析表明，上述阿魏酰低聚糖由木糖、阿拉伯糖和阿魏酸三種成分組成；紫外光譜分析表明，F(xiàn)Os在MOPS緩沖液中在325nm處具有最大值；紅外光譜分析表明，F(xiàn)Os中存在羥基、酯鍵及阿拉伯糖基等特征基團(tuán)；電噴霧電離質(zhì)譜分析表明，F(xiàn)Os聚合度分別為6、5、4，由分子量分別為1118、986、854的阿魏酰阿拉伯糖基木六糖(FAX6)、阿魏酰阿拉伯糖基木五糖(FAX5)、阿魏酰阿拉伯糖基木四糖(FAX4)構(gòu)成。

阿魏酰低聚糖抗腫瘤及免疫增強(qiáng)活性藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)

一、FOs體外抗腫瘤活性實(shí)驗(yàn)

1.受試藥物的配制

精密稱取樣品FOs，加入DMSO溶解，在37℃超聲條件下充分稀釋成均勻溶液，按比例稀釋，濃度范圍為1000ug/ml～7.8ug/ml。

2.腫瘤細(xì)胞株的培養(yǎng)

細(xì)胞株BGC-823和HepG2采用添加10％胎牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液，細(xì)胞株A549采用添加10％胎牛血清的F-12Nutrient?Mixture培養(yǎng)液，在37.0℃、空氣濃度95％和CO₂濃度5％的條件下培養(yǎng)。

3.細(xì)胞生長抑制實(shí)驗(yàn)