[發明專利]一種食管癌相關新基因

有效

• 申請號: 99117524.7
• 申請日: 1999-08-10
• 公開（公告）號: CN1283695A
• 公開（公告）日: 2001-02-14
• 發明（設計）人: 王明榮;許智雄;蔡巖;徐昕;韓亞玲;吳孔明;王子平;王秀琴;吳旻
• 申請（專利權）人: 中國醫學科學院腫瘤醫院腫瘤研究所
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12N15/63;C12P21/00;A61K38/16;C12Q1/68
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所
• 代理人: 陳文平

本發明涉及一種食管癌相關基因、該基因編碼的多肽、以及該基因和多肽的用途和制備方法。

利用分子生物學技術，從分子水平認識疾病的病理根源是發現或提供這些疾病的有效治療方法的有利途徑。由于現有技術中還有大量疾病沒有找到有效的治療方法，包括大部分癌癥，因此迫切需要找到與這些疾病的病理相關的基因，特別是那些與這些疾病呈負相關、可能用于這些疾病的治療的基因。

本發明的目的就是提供一種新的與食管癌負相關的基因和該基因編碼的多肽。

本發明涉及一種分離的多核苷酸，其包含選自下組的成員：

(a)編碼SEQ?ID?No.2所示多肽或編碼CGMCC保藏號0402(cDRC1)的克隆所含cDNA所編碼的成熟多肽的多核苷酸；

(b)能與(a)的多核苷酸雜交并與其有至少70％一致性的多核苷酸；和

(c)(a)或(b)多核苷酸的多核苷酸片段。

本發明進一步涉及含有上述多核苷酸的載體，用該載體遺傳工程化的宿主細胞和包括培養該宿主細胞以表達所述多核苷酸編碼的多肽并從培養物中回收目標多肽的多肽生產方法。本發明還涉及一種產生能表達多肽的細胞的方法，包括用所述載體轉化或轉染細胞。

本發明另一方面涉及選自下組的一種多肽：

(a)具有SEQ?ID?No.2的推定氨基酸序列的多肽或其片段、類似物和衍生物；

(b)CGMCC保藏號0402的克隆所含cDNA編碼的多肽或其片段、類似物和衍生物。

本發明也涉及抗上述多肽的抗體。

本發明還涉及一種體外診斷與本發明上述多肽的表達有關的疾病或疾病易感性的方法，包括在來自宿主的樣品中：

(a)測定編碼所述多肽的基因核酸序列中的突變、缺失及重排；和/或

(b)測定編碼所述多肽的基因核酸序列中的甲基化；和/或

(c)測定編碼所述多肽的基因mRNA的異常。

本發明另外涉及一種體外診斷方法，包括在來自宿主的樣品中分析本發明多肽的存在或量的改變。

本發明上述的和其它的方面對于本領域的技術人員來說，從本文以下的詳細描述看應該是很清楚的。

本發明一方面提供了新的多肽，它們是人食管蛋白質多肽pDRC1，及其具有生物活性的診斷或治療有用的片段、類似物和衍生物。本發明的另一方面，提供了編碼這些多肽的分離的核酸分子(DRC1)，包括mRNA、DNA、cDNA(cDRC1)和基因組DNA(gDRC1)，及其具有生物活性的診斷或治療有用的片段、類似物和衍生物。本發明的再一方面提供了核酸的探針，它包含足夠長度的核酸分子以及與DRC1基因序列進行特異性雜交的序列。

圖1顯示了DRC1的cDNA序列和由此推斷的氨基酸序列。這里所用的是標準的氨基酸單字母縮寫。用ABIPRISM*377?DNA自動測序儀(Takara公司)進行測序，測序的準確性預計高于98％。

圖2是Northern印跡分析的結果圖。

圖3是RT-PCR分析的結果圖。

依據本發明的一方面，它提供了一種分離的核酸(多核苷酸)，這些核苷酸編碼具有圖1(SEQ?ID?No.2)所示的推定的氨基酸序列的多肽或者編碼1999年6月23日以CGMCC保藏號0402(cDRC1)保藏的克隆cDNA編碼的多肽。

編碼pDRC1的多核苷酸可以從許多成人和胎兒的cDNA文庫中分離，如成人食管的cDNA文庫。SEQ?ID?No.1和SEQ?ID?No.3所示的多核苷酸序列具有編碼一個含495氨基酸殘基的蛋白質的開放閱讀框架。該蛋白與人Profilaggrin(GenBank?No.：A45135)N-端具有最高程度的同源性，在連續的88個氨基酸中有42％的氨基酸相同，65％的氨基酸類似。與人Trichohyalin(GenBank?No.：Q07283)N-端在連續的225個氨基酸中有33％的氨基酸相同，49％的氨基酸類似。

本發明的多核苷酸可能以RNA或DNA的形式存在，其中DNA包括cDNA、基因組DNA和合成的DNA。DNA可以是雙鏈或者單鏈的，單鏈也可以是編碼鏈或者非編碼(反義)鏈。編碼多肽的編碼序列可以與圖1(SEQ?ID?No.1或SEQ?ID?No.3)所示的編碼序列相同，也可以與所保藏的克隆的編碼序列相同，或者可以是一個不同的編碼序列，由于遺傳密碼的冗余或簡并性，它與圖1(SEQ?ID?No.2)的或者保藏的cDNA編碼相同的成熟多肽。