[發明專利]脂類分散液及其制備方法

無效

• 申請號: 96111024.4
• 申請日: 1996-05-24
• 公開（公告）號: CN1088195C
• 公開（公告）日: 2002-07-24
• 發明（設計）人: 山本智浩;吉岡俊彥;南海史朗
• 申請（專利權）人: 松下電器產業株式會社
• 主分類號: G01N33/92
• 分類號: G01N33/92
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司
• 代理人: 王景朝

技術領域

本發明一種用作測定脂類含量的標準溶液的水分散液以及這種分散液的制備方法。

背景技術

目前，業已迅速廣泛地利用一種近期開發出的酶促測定法來測定體液中的脂類含量，尤其是測定膽固醇的含量，并且這種脂類測定方法在臨床診斷領域中用得愈來愈多。因此，需要一種合適的用于測定脂類含量的標準溶液。然而，脂類本質上難溶于水，于是，專門使用那些溶于有機溶劑的脂類標準溶液。因此，這些標準溶液中的脂類在存在狀態和流動性方面與體液(例如血清)中的脂類不同。這會導致標準溶液與作為樣品的體液(例如血清)之間在反應性上具有較大差異，從而使測定值發生偏差。

因此，業已使用來源于人或動物的血清或提純脂蛋白膽固醇作為標準溶液。例如，在日本專利公開文本No.56-101555中描述了這種純化脂蛋白膽固醇的方法。然而，在使用血清的方法中，要得到廉價的血清是困難的，同時，未知雜質可能會影響測定值。用于純化脂蛋白的方法還具有操作復雜的問題。

為了改善這些缺陷，業已使用那些用表面活性劑加溶于水的脂類作為標準溶液。然而，需要大量的表面活性劑來使脂類加溶于水。因此，利用此方法制備的溶液的粘度高，并且有時處理起來困難。????

為了解決這個問題，建議采用表面活性劑和脂類的混合物，其中表面活性劑和脂類的HLB值不同(例如參見日本公開專利文本No.57-84356)。然而，對于利用此方法得到的溶液，在上述的酶促測定方法中，溶液中存在的表面活性劑有時會抑制酶促反應。由于脂類的分散形式與血清中的不同，因此按照此測定方法，這種溶液有時不適于用作標準溶液。

如上所述，業已研究出各種利用一個簡單的操作過程即可穩定溶解或分散脂類的方法。

然而，如上所述脂類的這種分散形式明顯不同于血清中的分散形式的事實，有時會造成問題，即阻礙將此溶液用作校正儀器的標準溶液。考慮到這一點，還是利用了用表面活性劑分散脂類的方法。然而，當可以使用表面活性劑時還有一個問題即是：不能穩定地分散生理上產生的較高濃度的膽固醇。

為了解決上述這些問題，本發明的發明人進行了深入的研究。結果，發現一種分散液表現出作為膽固醇標準溶液的極好特性，如下制備這種分散液：首先將膽固醇、卵磷脂、一種表面活性劑以及一種中性類脂和/或一種膽甾醇酯按一特定的濃度比范圍加入到有機溶劑中，其次從制得的混合物中蒸發掉有機溶劑，然后使得到的類似薄膜的混合物用溫度被加熱到比卵磷脂的相變溫度高的水或緩沖液溶脹，最后利用超聲輻射分散此溶液而得到這種分散液。

發明簡介

本發明提供了一種脂類分散液，包括以下組分：一種膽汁酸或其鹽、用作脂類的一種磷脂、膽固醇以及從膽甾醇脂和中性類脂構成的組合中選擇的至少一種組分，還有作為分散介質的水或一種含水溶劑，其中膽汁酸或其鹽以及脂類被分散在水或含水溶劑中。

本發明還提供了一種制備脂類分散液的方法，包括如下步驟：首先將膽汁酸或其鹽以及脂類溶于有機溶劑中，然后將有機溶劑從得到的溶液中蒸發掉，最后將水或含水溶劑加入到所含的殘留的固體中，以便施加一個物理剪切力。

施加物理剪切力的步驟最好是在脫氧的氣氛下進行的。

另外，蒸發有機溶劑的步驟最好是在膽汁酸或其鹽以及脂類能溶于有機溶劑的溫度下進行。

脂類包括一種磷脂、膽固醇以及從膽甾醇酯和中性類脂構成的組合中選擇的至少一種組分。

在本發明的一個實施例中，優選的是：將膽固醇亞油酸酯用作膽固醇和膽甾醇酯，將卵磷酯用作磷脂，將牛磺脫氧膽酸鈉用作膽酸鹽，以及將三硬脂酸甘油酯用作中性類脂。并且較為可取的是：膽固醇以及膽甾醇酯的總和與卵磷脂的重量比為1∶1至1∶4，膽酸鹽與卵磷脂的重量比為1∶1至1∶20，中性類脂與卵磷脂的重量比為1∶10至1∶5，以及當卵磷脂最后分散于水或緩沖劑中時卵磷脂的濃度不超過1000mg/dl。

利用上述方法制備的膽固醇標準溶液具有與在血清脂類相似的分散形式和粒度，并且能提供一種膽固醇和膽甾醇酯的總濃度約少于1000mg/dl的分散液。如此制備的膽固醇分散液相當穩定并且能貯存一段長的時間。

從以下結合附圖所進行的詳細描述中將更好地理解和體會本發明(關于構成和內容)以及本發明的其它目的和性質，同時所附的權利要求書中特別闡明了本發明的這些新穎特性。

具體實施方式

下面的例子進一步詳細說明了本發明，但不能認為是對本發明范圍的限制。例1