[發明專利]一種鑒別黑龍江與珠江翹嘴鱖的方法

在審

• 申請號: 202310764490.1
• 申請日: 2023-06-27
• 公開（公告）號: CN116656840A
• 公開（公告）日: 2023-08-29
• 發明（設計）人: 孫志鵬;魯翠云;鄭先虎;劉天奇;那榮濱;何立川
• 申請（專利權）人: 中國水產科學研究院黑龍江水產研究所
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12N15/11
• 代理公司: 哈爾濱市文洋專利代理事務所(普通合伙) 23210
• 代理人: 何強

1.一種鑒別黑龍江與珠江翹嘴鱖的方法，其特征在于鑒別黑龍江與珠江翹嘴鱖的方法按照以下步驟進行：

一、采集翹嘴鱖待檢樣本；

二、提取待檢樣本基因組DNA；

三、PCR反應，所用特異標記為GY074、GY112或GY122；

四、凝膠電泳判別翹嘴鱖樣本種群：

GY074擴增圖譜中條帶大于200bp的個體來源于黑龍江翹嘴鱖種群；GY074擴增圖譜中條帶小于186bp的個體來源于珠江翹嘴鱖種群；

GY112擴增圖譜中具有150bp條帶的個體來源于黑龍江翹嘴鱖種群；GY112擴增圖譜中無150bp條帶且條帶大于160bp的個體來源于珠江翹嘴鱖；

GY122擴增圖譜中條帶小于138bp的個體來源于黑龍江翹嘴鱖；GY122擴增圖譜中條帶大于146bp的個體來源于珠江翹嘴鱖；

根據特異標記擴增圖譜即實現了黑龍江與珠江翹嘴鱖的鑒別。

2.根據權利要求1所述的一種鑒別黑龍江與珠江翹嘴鱖的方法，其特征在于步驟一中翹嘴鱖待檢樣本為受精卵、幼魚或成魚的鰭條。

3.根據權利要求1所述的一種鑒別黑龍江與珠江翹嘴鱖的方法，其特征在于步驟二中提取基因組DNA的方法：采用有機抽提法或者試劑盒提取，控制消化時間為20～40min，用紫外分光度計測定純度和濃度，稀釋到50ng/μL。

4.根據權利要求1所述的一種鑒別黑龍江與珠江翹嘴鱖的方法，其特征在于步驟三中GY074的微衛星序列位于翹嘴鱖基因組7號連鎖群，其核心重復序列為(GTCT)₈(ATCT)₁₁；特異標記GY112的微衛星序列位于11號連鎖群，其核心重復序列為(ACAT)₁₁；特異標記GY122的微衛星序列位于12號連鎖群，其核心重復序列為(CAGA)₁₂。

5.根據權利要求1所述的一種鑒別黑龍江與珠江翹嘴鱖的方法，其特征在于步驟三中的3個特異標記的微衛星序列及引物序列分別為：

GY074微衛星序列如SEQ?ID?NO：1所示：

上游引物：5’-GGATGAACCTTGCTTTAGGG-3’

下游引物：5’-TCCCTTTGCAGAAGAATCGC-3’

GY112微衛星序列如SEQ?ID?NO：2所示：

上游引物：5’-TCTTTACCTGGAGAGGACGG-3’

下游引物：5’-GGCATGTTATGGTCAGGAGG-3’

GY122微衛星序列如SEQ?ID?NO：3所示：

上游引物：5’-ATCACCCAACTGCAGATTCC-3’下游引物：5’-TCCACAGCTAAGTTAGTCGC-3。