[發(fā)明專利]一種蛋雞卵巢氧化應激模型建立方法及延長產(chǎn)蛋期的方法

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• 申請日: 2023-05-25
• 公開（公告）號: CN116602264A
• 公開（公告）日: 2023-08-18
• 發(fā)明（設計）人: 郝二英;陳輝;劉雪露;艾嘉偉;黃晨軒;王德賀;陳一凡;石雷
• 申請（專利權）人: 河北農(nóng)業(yè)大學
• 主分類號: A01K67/02
• 分類號: A01K67/02;A23K50/75;A23K10/30;A23K10/37;A23K10/22;A23K20/158;A23K20/26;A23K20/22;A23K20/20;A23K20/142;A23K20/105;A23K20/189
• 代理公司: 北京知藝互聯(lián)知識產(chǎn)權代理有限公司 16137
• 代理人: 孟晨光

本發(fā)明公開了一種蛋雞卵巢氧化應激模型建立方法及延長產(chǎn)蛋期的方法，包括體內(nèi)氧化應激模型的建立和體外氧化應激模型的建立。體內(nèi)氧化應激模型的建立，包括：選取高產(chǎn)期蛋雞，連續(xù)注射地塞米松15d，劑量為20mg/kg，后15d注射等量生理鹽水。體外氧化應激模型的建立，包括：分離培養(yǎng)蛋雞卵巢原代顆粒細胞，接種于培養(yǎng)板，采用50umol/L的Hsubgt;2/subgt;Osubgt;2/subgt;處理卵巢原代顆粒細胞6h。本發(fā)明采用上述的一種蛋雞卵巢氧化應激模型建立方法及延長產(chǎn)蛋期的方法，能夠探究蛋雞卵巢衰老的原因，通過褪黑素延長蛋雞的產(chǎn)蛋期，并在基因水平上做出解釋。

技術領域

本發(fā)明涉及家禽飼養(yǎng)技術領域，尤其是涉及一種蛋雞卵巢氧化應激模型建立方法及延長產(chǎn)蛋期的方法。

背景技術

隨著家禽業(yè)集約化程度的提高，養(yǎng)殖環(huán)境與動物生物學特性背離的增加，以及各種環(huán)境應激造成的機體與組織活性氧(ROS)的增加，使機體產(chǎn)生氧化應激反應，最終會導致家禽的生產(chǎn)性能下降。

蛋雞的產(chǎn)蛋性能主要取決于卵巢中生殖細胞以及卵泡的生長發(fā)育水平，而卵泡內(nèi)數(shù)量、比重以及功能最多的細胞是顆粒細胞，其增殖分化和凋亡主導卵泡的發(fā)育，決定卵泡的閉鎖，閉鎖卵泡的數(shù)量直接影響產(chǎn)蛋率的高低。目前，有關蛋雞的卵巢氧化應激的研究其系統(tǒng)性、探究的機理性并不完善，多數(shù)研究只針對如何建立體內(nèi)氧化應激模型或體外氧化應激模型進行研究，研究方面單一，并未對引起蛋雞氧化應激的機制作出解釋，也未給出如何緩解蛋雞卵巢的氧化應激，即當前建立蛋雞卵巢氧化應激模型與緩解氧化應激均為單獨的研究，二者并沒有很好的結合起來。有研究對褪黑素緩解氧化應激作出了研究，但是并未解釋褪黑素如何緩解蛋雞卵巢氧化應激。因此，為了探究氧化應激造成蛋雞卵巢功能損傷從而降低產(chǎn)蛋期的機制，以及褪黑素緩解蛋雞卵巢氧化應激從而延長產(chǎn)蛋期的機制，亟需一種蛋雞卵巢氧化應激模型建立方法及延長產(chǎn)蛋期的方法。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種蛋雞卵巢氧化應激模型建立方法及延長產(chǎn)蛋期的方法，能夠探究蛋雞卵巢衰老的原因，通過褪黑素延長蛋雞的產(chǎn)蛋期，并在基因水平上做出解釋。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了一種蛋雞卵巢氧化應激模型建立方法，包括體內(nèi)氧化應激模型的建立和體外氧化應激模型的建立。

優(yōu)選的，所述體內(nèi)氧化應激模型的建立，包括以下步驟：選取高產(chǎn)期蛋雞，連續(xù)注射地塞米松15d，劑量為20mg/kg，后15d注射等量生理鹽水；進行預實驗7d，試驗期30d，飼糧為玉米-豆粕型基礎飼糧；

所述預實驗和試驗期溫度均為21-25℃，相對濕度為55-75％，光照條件為16L：8D，試驗期間所有蛋雞自由采食、自由飲水。

優(yōu)選的，所述飼糧包括以下質量份的原料組成：玉米62份，豆粕24份，大豆油1份，魚粉2份，磷酸氫鈣1份，石粉9份，氯化鈉0.32份，蛋氨酸0.12份，蘇氨酸0.1份，氯化膽堿0.1份，預混料0.3份，植酸酶0.02份，賴氨酸0.04份。

優(yōu)選的，所述體外氧化應激模型的建立，包括以下步驟：分離培養(yǎng)蛋雞卵巢原代顆粒細胞，接種于培養(yǎng)板，采用50umol/L的H₂O₂處理卵巢原代顆粒細胞6h。

本發(fā)明還提供了一種蛋雞卵巢氧化應激延長產(chǎn)蛋期的方法，在建立上述的體內(nèi)氧化應激模型的同時，選取相同數(shù)量的高產(chǎn)期蛋雞，連續(xù)注射地塞米松15天，劑量為20mg/kg，后15天注射等量褪黑素；進行預實驗7d，試驗期30d，飼量為基礎日糧；通過生產(chǎn)性能、蛋品質、血液指標、不同發(fā)育階段卵泡數(shù)量、細胞凋亡相關基因、抗氧化基因、FOXO1表達、卵巢Bcl-2、SOD1、FOXO1蛋白表達趨勢對產(chǎn)蛋期進行檢測；

優(yōu)選的，所述生產(chǎn)性能包括每天產(chǎn)蛋總數(shù)、總蛋重、每周飼糧消耗量、平均蛋重、產(chǎn)蛋率、平均日采食量、料蛋比；

優(yōu)選的，所述蛋品質包括蛋形指數(shù)、蛋殼強度、蛋殼厚度；