[發明專利]一種可升降式細胞培養皿及其在體外細胞接觸共培養中的應用

在審

• 申請號: 202310245427.7
• 申請日: 2023-03-15
• 公開（公告）號: CN116376700A
• 公開（公告）日: 2023-07-04
• 發明（設計）人: 趙峰;尤鉞;李金霞;張舜鈺
• 申請（專利權）人: 中國科學院高能物理研究所
• 主分類號: C12M3/04
• 分類號: C12M3/04;C12M3/00
• 代理公司: 青島智地領創專利代理有限公司 37252
• 代理人: 王曉鳳

1.一種可升降式細胞培養皿，包括皿蓋和皿體，皿蓋、皿體相適配，所述皿體為上開口的結構，其特征在于，所述皿體包括細胞腔室、皿底座、分隔壁和升降部；

所述細胞腔室的內側底部為細胞培養面，細胞腔室底部外側圍有一圈中空的皿底座，其與細胞腔室的外側壁一體連接，所述細胞培養面中央向下延伸設有一個由豎直分隔壁圍成的中空管狀隧道，分隔壁的頂端面與細胞培養面齊平；

所述升降部從上到下依次包括升降平臺、升降桿、推拉柄，所述升降平臺設置于管狀隧道中，其頂端面為水平面，其直徑設置與常規細胞爬片直徑相等的多個規格，且其側壁與分隔壁緊密貼合，升降平臺的底部與推拉柄之間通過升降桿連接與固定，在推拉柄的作用下升降平臺可沿著分隔壁上升或下降；

所述皿底座的底端是水平的，所述皿底座的高度大于整個所述升降部的最大高度，即所述推拉柄降至最低位置也不會超出皿底座的底端。

2.根據權利要求1所述的一種可升降式細胞培養皿，其特征在于，所述升降部采用手動推拉式升降，所述推拉柄為水平的圓柄，其向上推動升降桿，帶動升降平臺在管狀隧道中上升，其向下拉動升降桿，帶動升降平臺下降。

3.根據權利要求2所述的一種可升降式細胞培養皿，其特征在于，所述分隔壁內側在距離細胞培養面一定高度處對稱設置凸點，所述升降平臺側壁在不同高度設置多個與凸點相適配的卡槽，當凸點與最高位置的卡槽卡合在一起，此時升降平臺的頂端面與細胞培養面的高度差為一個細胞爬片的高度。

4.根據權利要求3所述的一種可升降式細胞培養皿，其特征在于，所述推拉柄的直徑大于管狀隧道的直徑，推拉柄向上推至管狀隧道底部時，升降平臺上升到最高位置，此時升降平臺的頂端面高于所述細胞培養面，但未超出細胞腔室的高度，升降平臺的底端面低于細胞培養面。

5.根據權利要求1所述的一種可升降式細胞培養皿，其特征在于，所述升降部采用螺旋式升降，升降平臺的底部中央設置豎直的、帶有內螺紋的螺紋孔，升降桿為螺桿，所述螺桿的外徑與螺紋孔內徑的大小、紋路相適配；所述推拉柄為旋柄，旋柄旋轉帶動升降平臺上升或下降，若螺桿的螺紋旋向為右旋，旋柄順時針旋轉時升降平臺上升，逆時針旋轉時升降平臺下降。

6.根據權利要求5所述的一種可升降式細胞培養皿，其特征在于，所述螺桿旋轉至螺紋孔最深處時，升降平臺的頂端面與細胞培養面的高度差為一個細胞爬片的高度，為升降平臺的最低位置。

7.根據權利要求6所述的一種可升降式細胞培養皿，其特征在于，當旋柄旋至皿底座底端平面時，升降平臺上升到最高位置，此時升降平臺的頂端面高于所述細胞培養面，但未超出細胞腔室的高度，升降平臺的底端面低于細胞培養面。

8.一種可升降式細胞培養皿在體外細胞接觸共培養中的應用，其特征在于，具體步驟包括：

(1)取兩個可升降式細胞培養皿，設置所述升降平臺頂端面的高度均與細胞培養面相差一個細胞爬片的高度，然后均放上一個細胞爬片，使細胞培養面、分隔壁頂端面與細胞爬片三者構成一個完整的平面，此平面直徑為細胞腔室內徑，細胞培養面和分隔壁頂端面均進行了TC表面處理；

(2)將上述兩個可升降式細胞培養皿中分別接種不同的細胞，并分別于適宜的完全培養基中培養，蓋上皿蓋，放入CO₂細胞培養箱中進行培養；

(3)培養一定時間后，當兩個可升降式細胞培養皿中的細胞融合度達到70～80％時，分別快速移除培養皿中的舊培養基，將升降平臺頂端面升至高于細胞培養面的高度，用鑷子迅速取走升降平臺上的細胞爬片，再將升降平臺降至最低位置，把兩個可升降式細胞培養皿中的細胞爬片相互調換，并加入新鮮的混合培養基，蓋上皿蓋，繼續培養；隨后進行后續相關生物學指標的探究。

9.根據權利要求8所述的應用，其特征在于，所述混合培養基是步驟(2)中兩種細胞的完全培養基以1:1的比例混合后的培養基。