[發(fā)明專(zhuān)利]一種蚯蚓血紅蛋白凍干制劑的制備方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202310146727.X
• 申請(qǐng)日: 2023-02-15
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN116239676A
• 公開(kāi)（公告）日: 2023-06-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 榮龍;余春紅;任烽;陳露;金怡杉
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 北京航空航天大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C07K14/805
• 分類(lèi)號(hào): C07K14/805;C07K1/34;C07K1/14
• 代理公司: 北京達(dá)友眾邦知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11904
• 代理人: 雷森

1.一種蚯蚓血紅蛋白凍干制劑的制備方法，其特征在于：具有包括以下步驟：

S1、前處理：取人工飼養(yǎng)的蚯蚓作為原料，先放入15-25℃的是中吐沙清洗2-3次，洗凈后的蚯蚓，用剪刀預(yù)先剪碎成0.5-1.4cm的小塊，裝入容器中；

S2、提?。合蛉萜髦屑尤腩A(yù)冷的蒸餾水，將容器放置在提取設(shè)備的指定部位，啟動(dòng)提取本設(shè)備進(jìn)行提取，得到粗提蚯蚓液，然后將粗提蚯蚓液置于離心設(shè)備中離心處理20-25min；

S3、分離：取步驟S2離心后的上清液，按1：0.5-1.2的比例加入預(yù)先調(diào)配好的聚乙二醇和硫酸銨的混合溶液中，通過(guò)攪拌設(shè)備攪拌8-10min，得到有絮狀沉淀的混合液，將混合液置于離心設(shè)備中離心處理15-20min，去除上清液，用蒸餾水清洗沉淀上的殘留的液體；

S4、過(guò)濾：將沉淀與蒸餾水復(fù)溶，得到均一穩(wěn)定的蚯蚓血紅蛋白溶液，再將得到的蚯蚓血紅蛋白溶液通過(guò)過(guò)濾設(shè)備過(guò)濾；

S5、制劑：將步驟S4透析脫鹽處理后的蚯蚓血紅蛋白溶液放入冷凍干燥設(shè)備中，在無(wú)菌密閉環(huán)境中，在-6--2℃下凍結(jié)5-6h，再通過(guò)降低環(huán)境氣壓，緩慢升高蚯蚓血紅蛋白溶液的溫度，6-8h后使蚯蚓血紅蛋白溶液中的水分升華，留下固體形態(tài)的疏松塊狀或粉末狀蚯蚓血紅蛋白提取物，即得到純凈的蚯蚓血紅蛋白凍干制劑。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種蚯蚓血紅蛋白凍干制劑的制備方法，其特征在于：所述步驟S2中蚯蚓與蒸餾水的質(zhì)量比例為1：1-5。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種蚯蚓血紅蛋白凍干制劑的制備方法，其特征在于：所述步驟S3中聚乙二醇溶液和硫酸銨溶液預(yù)先配制的比例為1：0.2-0.4。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種蚯蚓血紅蛋白凍干制劑的制備方法，其特征在于：所述步驟S2中離心處理是以5000-9000rpm的轉(zhuǎn)速，3-6℃的溫度進(jìn)行處理。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種蚯蚓血紅蛋白凍干制劑的制備方法，其特征在于：所述步驟S3中離心處理是以2000-3000rpm的轉(zhuǎn)速，3-6℃的溫度進(jìn)行處理。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種蚯蚓血紅蛋白凍干制劑的制備方法，其特征在于：所述步驟S4中加入蒸餾水的體積為步驟S2離心后上清液的1-2倍。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種蚯蚓血紅蛋白凍干制劑的制備方法，其特征在于：所述步驟S4中過(guò)濾過(guò)程中通過(guò)采用生物質(zhì)濾膜進(jìn)行透析脫鹽處理。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種蚯蚓血紅蛋白凍干制劑的制備方法，其特征在于：所述步驟S3中用蒸餾水清洗沉淀殘留液體是采用沖洗的方式，沖洗3-5次。