[發明專利]一種用于檢測水產品中甲霜靈對映體和甲霜靈酸對映體殘留的方法

在審

• 申請號: 202310109504.6
• 申請日: 2023-02-10
• 公開（公告）號: CN116008437A
• 公開（公告）日: 2023-04-25
• 發明（設計）人: 周豪;尹怡;張媚玉;鄭光明;單奇;馬麗莎;林嘉薇;李麗春
• 申請（專利權）人: 中國水產科學研究院珠江水產研究所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72;G01N30/86
• 代理公司: 北京博爾赫知識產權代理事務所(普通合伙) 16045
• 代理人: 王燦

1.一種用于檢測水產品中甲霜靈對映體和甲霜靈酸對映體殘留的方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1.水產品的帶皮肌肉組織與乙酸乙酯按照1～3g：10mL混合，振蕩提取1～3次，合并上清液，氮吹干所述上清液后，用乙腈水溶液復溶，得待凈化液；

S2：采用固相萃取柱，對所述待凈化液進行凈化，收集洗脫液，氮吹干所述洗脫液后，用乙腈水溶液復溶，濾膜過濾，得待測液；

S3：對所述待測液進行手性液相色譜-串聯質譜分析檢測，測得水產品中甲霜靈對映體和甲霜靈酸對映體殘留；

其中，液相色譜所用色譜柱為多糖類手性色譜柱；所述質譜采用電噴霧電離正離子多反應檢測模式進行。

2.如權利要求1所述檢測水產品中甲霜靈對映體和甲霜靈酸對映體殘留的方法，其特征在于，所述水產品為草魚、鯽魚、鯉魚、烏鱧、羅非魚和大口黑鱸中的一種。

3.如權利要求1所述檢測水產品中甲霜靈對映體和甲霜靈酸對映體殘留的方法，其特征在于，S1中所述水產品的帶皮肌肉組織與乙酸乙酯混合為渦旋混勻，渦旋時間為0.5～2min；S1中所述每次振蕩提取時間為10～20min；S1中振蕩提取后，離心獲得上清液，離心轉速為4500～5500r/min，離心時間為3～7min；S1中氮吹在35～45℃水浴中進行，S1中所述乙腈水溶液的體積濃度為5～20％，乙腈水溶液用量為2～4mL。

4.如權利要求1所述檢測水產品中甲霜靈對映體和甲霜靈酸對映體殘留的方法，其特征在于，S2中所述凈化具體為：依次用甲醇、水、氨水溶液活化固相萃取柱，將待凈化液上樣，氨水溶液和甲醇水溶液依次淋洗，棄去淋洗液，低真空抽干，用甲酸甲醇溶液洗脫。

5.如權利要求1所述檢測水產品中甲霜靈對映體和甲霜靈酸對映體殘留的方法，其特征在于，S2所述淋洗用氨水溶液用量為2～4mL，體積濃度為0.1～1％，淋洗用甲醇水溶液用量為2～4mL，體積濃度為5～20％；S2中所述甲酸甲醇溶液用量為2～4mL，體積濃度為0.1～5％；S2中所述氮吹在35～45℃水浴中進行；S2中所述乙腈水溶液的體積濃度為20～70％，乙腈水溶液用量為0.3～0.7mL。

6.如權利要求1所述檢測水產品中甲霜靈對映體和甲霜靈酸對映體殘留的方法，其特征在于，S2中所用固相萃取柱為MAX小柱，型號為3cc/60mg，60μm。

7.如權利要求1所述檢測水產品中甲霜靈對映體和甲霜靈酸對映體殘留的方法，其特征在于，S3中所述多糖類手性色譜柱內徑為2.1～4.6mm，柱長為100～250mm，填料粒徑為3～10μm；固定相為硅膠表面涂覆或接枝纖維素-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)；流動相為甲酸水溶液和甲酸乙腈溶液，體積比為1：(1～5)；水溶液和乙腈溶液中甲酸的體積濃度分別為0.05～0.2％；流速為0.2～0.6mL/min，柱溫為20～35℃，進樣體積為1～10μL。

8.如權利要求1所述檢測水產品中甲霜靈對映體和甲霜靈酸對映體殘留的方法，其特征在于，S3中所述電噴霧電離正離子多反應監測模式，采用電噴霧離子源電離，正離子在m/z?100～1000掃描，利用三重四極桿質譜儀進行選擇反應監測分析；電噴霧電壓為3500～5500V，滯留時間為20～100ms，氮氣流速為6～12L/min，離子源溫度為300～500℃，甲霜靈的定量離子對為280.2/220.1、定性離子對為280.2/192.1，甲霜靈酸的定量離子對為266.1/220.1、定性離子對為266.1/192.1；所用內標為甲霜靈氘代物甲霜靈-D₆，內標甲霜靈氘代物離子對為286.2/226.2。