[發明專利]NKT細胞、其衍生細胞及在制備抗腫瘤藥物中的應用

有效

• 申請號: 202310059150.9
• 申請日: 2023-01-16
• 公開（公告）號: CN116376824B
• 公開（公告）日: 2023-10-10
• 發明（設計）人: 許衛東;焦峰;顧國生
• 申請（專利權）人: 南京愛比洛醫藥科技有限公司
• 主分類號: C12N5/0783
• 分類號: C12N5/0783;C12N5/10;C12N15/13;C12N15/62;C07K19/00;A61K35/17;A61P35/00;A61P35/02
• 代理公司: 南京中律知識產權代理事務所(普通合伙) 32341
• 代理人: 沈振濤

本發明公開了一種NKT細胞、其衍生細胞及在制備抗腫瘤藥物中的應用，所述NKT細胞命名為ABL?01，保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏日期為2023年1月11日，保藏編號為C202314。本發明ABL?01細胞不會引起排異反應，適合回輸給不同的癌癥患者，不僅對癌細胞株具有殺傷力，對原代肺癌細胞和原代卵巢癌細胞也具有很強的裂解效果，同時還可以識別和裂解其他多種癌細胞。本發明還對ABL?01進行加工和升級，參照嵌合抗原受體（CAR）的原理構建了CAR?UNKT，將靶向間皮素的單鏈抗體基因整合到ABL?01的染色體中，構建后的CAR?UNKT就能精準地識別和殺傷卵巢癌細胞，而不攻擊正常細胞。

技術領域

本發明屬于NKT細胞技術領域，具體涉及一種NKT細胞、其衍生細胞及在制備抗腫瘤藥物中的應用。

背景技術

癌癥防治形勢十分嚴峻，中國在0-64歲國民中，每死亡4人，即有1人死于癌癥。目前，中國每年用于癌癥患者的治療費用高達1000億元，患者人均支出約7萬元、晚期癌癥的治療基本要花掉患者家庭的全部積蓄。

以細胞治療為主的精準醫療已經得到了高度關注。腫瘤治療的常規手段主要有手術、放療和化療。這些治療措施都具有巨大的副作用，而免疫治療則相對安全，因此越來越受到重視。免疫治療通過提升患者免疫系統的功能，利用免疫細胞去清除體內的癌細胞，從而達到治愈癌癥的效果。免疫治療主要又分抗體治療和細胞治療兩種。目前最流行的PD-1抗體治療，通過阻斷對CD8+T細胞的抑制來加強CD8+T細胞對癌細胞的殺傷功能。細胞免疫治療則是一種過繼性治療，該技術首先對患者自身T細胞在體外進行基因工程加工和擴增，然后再注射回患者體內。這種加工后的T細胞稱為嵌合抗原受體修飾的T細胞，或簡稱CAR-T（chimeric?antigen?receptor-modified?T?cells）。CAR-T在治療白血病，多發性骨髓瘤等血液腫瘤方面已經獲得成功。并且國內已有兩款CAR-T細胞治療藥物獲得CFDA批準。

雖然CAR-T對血液腫瘤效果顯著，但是CAR-T對實體瘤療效甚微。嵌合抗原受體T細胞（CAR-T）治療是抗腫瘤免疫治療最熱門的領域之一，也是近十年來免疫醫學的重大突破。作為CAR-T細胞的核心結構，CAR是一種基因工程加工的融合蛋白，可以在細胞表面表達并能特異性識別腫瘤抗原。它主要由細胞外單鏈抗體可變區（scFv）、鉸鏈區、跨膜區和細胞內結構域組成。細胞外scFv結構一般由腫瘤抗原對應的抗體修飾而來。原則上，CAR-T細胞識別抗原的方式不同于天然TCR結構，不依賴于MHC抗原呈遞，有利于克服MHC表達下調引起的免疫逃逸，進一步拓展T細胞治療的應用。目前，靶向CD19的CAR-T細胞治療在血液腫瘤治療方面取得了顯著進展。在全球范圍內，已有八種CAR-T產品獲得批準，主要針對CD19和BCMA。在實體瘤方面，針對不同類型腫瘤的靶點已經開發出來，CAR-T細胞療法陸續進入臨床試驗。然而，大多數臨床試驗并未達到預期效果，主要障礙是腫瘤抗原的異質性、免疫逃逸和免疫抑制腫瘤微環境。盡管目前該領域的進展已被證明相當緩慢，但隨著更多靶點的發現和未來臨床試驗的優化，實體瘤有望成為CAR-T的主要治療領域。

間皮素（MSLN）是一種細胞表面糖蛋白，在大多數惡性胸膜間皮瘤、卵巢癌、胰腺癌和直腸癌中過表達，而正常組織表達很少。由于MSLN在正常組織和腫瘤組織之間差異表達，MSLN是腫瘤治療的潛在靶點之一。在臨床前研究中，Carl?June的研究小組觀察到CAR-T通過靶向MSLN具有更大的抗腫瘤作用。隨后，他們使用mRNA轉染的CAR-T評估了MSLN作為靶標在臨床實踐中的療效，并報道了CAR-T在乳腺癌患者中的安全性和有效性。另一項I期臨床試驗評估了靶向MSLN的CAR-T治療轉移性胰腺導管腺癌的療效。靜脈滴注CAR-T后，臨床結果顯示2例患者都出現對癥反應，無進展生存期分別為3.8個月或5.4個月。并且治療同樣具有良好的安全性。目前，已經對卵巢癌、胰腺癌、乳腺癌等多種實體瘤的治療進行了多項臨床研究，多項數據表明了該療法的可行性和安全性。