[發(fā)明專利]miRNA-483-5p在制備胰腺癌肝轉移診斷試劑盒中的應用

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• 申請日: 2023-01-16
• 公開（公告）號: CN116083583A
• 公開（公告）日: 2023-05-09
• 發(fā)明（設計）人: 孔祥毓;孫楓原;杜奕奇;李兆申;謝雨婷;孔凡揚;王凱旋;馮擁璞;李磊
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍海軍軍醫(yī)大學第一附屬醫(yī)院
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12N15/113
• 代理公司: 上海申浩律師事務所 31280
• 代理人: 趙青

本發(fā)明涉及醫(yī)學生物檢測技術領域，具體是miRNA?483?5p在制備胰腺癌肝轉移診斷試劑盒中的應用。本發(fā)明中的miRNA?483?5p或其與CA125及糖尿病病史聯(lián)合，針對胰腺癌患者是否發(fā)生肝轉移進行早期診斷，其可發(fā)現(xiàn)目前臨床上使用的CT和MRI等影像學檢查手段無法明確探知肝轉移灶的情況下(隱匿性/微小肝轉移)，對胰腺癌是否發(fā)生了肝轉移進行診斷，不僅提高了診斷的準確性，而且為肝轉移的臨床前發(fā)現(xiàn)提供了依據(jù)，對于肝轉移灶的早期診斷和醫(yī)療成本的節(jié)約都具有重要意義。

技術領域

本發(fā)明涉及醫(yī)學生物檢測技術領域，具體地說，是miRNA-483-5p在制備胰腺癌肝轉移診斷試劑盒中的應用。

背景技術

胰腺癌惡性程度高，早期診斷困難，預后極差。約80％-85％的患者在疾病晚期或者出現(xiàn)轉移相關癥狀后才獲得診治。其中，絕大多數(shù)患者在診斷時已發(fā)生了肝轉移，失去了手術切除的最佳時期。此外，超過60％的患者在腫瘤切除術后的兩年內復發(fā)并伴有肝轉移。可見肝轉移在胰腺癌患者中很常見，是導致患者預后差的關鍵因素。

盡管如此，目前臨床上對微小性，尤其是隱匿性肝轉移灶的準確診斷仍存在很大困難。影像學檢查(如MRI、增強CT)是目前判斷胰腺癌肝轉移最為常用的方式，但上述手段對微小轉移灶的敏感性欠佳，對于隱匿性肝轉移更是無從判定。造成很多已發(fā)生肝臟轉移的患者出現(xiàn)漏診，僅能在臨床隨訪后發(fā)現(xiàn)，無法為臨床治療方式的選擇提供依據(jù)，導致治療效果不佳。

因此，臨床上迫切需要高敏感性的檢測手段來早期判斷胰腺癌肝轉移，例如，采用高通量測序的方法檢測組織中的基因組，開發(fā)潛在的分子生物標志物，以克服影像學診斷方法的缺陷，在疾病早期評價胰腺癌患者發(fā)生肝轉移的風險，提高肝轉移的早診率，以便盡早干預治療，改善患者預后。

多項研究認為胰腺癌的預后與microRNA(miRNA)相關，其異常表達在胰腺癌細胞的起始、增殖、轉移和化學耐藥性中發(fā)揮重要作用，提示了miRNA可能作為胰腺癌肝轉移的診斷標志物。由于miRNA具有很強的抗降解能力，在組織、血漿和體液(如血清、尿液和母乳)中均可檢測到miRNA的穩(wěn)定表達，因此它們被認為是一種強大的診斷工具，但其在胰腺癌肝轉移中的作用尚未得到研究。對miRNA相關基因組學的分析研究或許能為胰腺癌伴肝轉移患者的診斷提供更加便捷高效的新方法。

就技術而言，miRNA的檢測本質上是一種組織RNA的qPCR檢測，具有操作簡便、檢測靈敏、特異性好、重復性高等特點，現(xiàn)今已越來越多地被應用于臨床檢驗技術中。

miRNA-483-5p(miRBase編號：MIMAT0004761)，其序列如下所示：AAGACGGGAGGAAAGAAGGGAG(SEQ?ID?NO:1)，該miRNA在人、小鼠、犬、牛等多種物種中廣泛存在，具有很強的保守性。目前尚無人類miRNA-483-5p與胰腺癌肝轉移相關性的研究報道。

糖尿病是一組因胰島素絕對或相對不足引起血糖升高的代謝異常疾病群。早在120多年前，胰腺癌與糖尿病的密切關系即已被關注。糖尿病與胰腺癌具有雙向的相互作用，關系較為復雜，一方面糖尿病可能促進胰腺癌發(fā)生，另一方面胰腺癌也可能誘發(fā)糖尿病。有研究表明：提示高血糖可能通過增強腫瘤的侵襲性和轉移能力而參與胰腺癌的惡性進展。

CA125是1981年由Bast等從上皮性卵巢癌抗原檢測出可被單克隆抗體OC125結合的一種糖蛋白，來源于胚胎發(fā)育期體腔上皮，在正常卵巢組織中不存在，因此最常見于上皮性卵巢腫瘤(漿液性腫瘤)患者的血清中，其診斷的敏感性較高，但特異性較差。黏液性卵巢腫瘤中不存在。近年來，有研究發(fā)現(xiàn)CA125與胰腺癌的轉移情況相關，血清中CA125高表達，預示著胰腺癌患者存在轉移的可能性。

目前為止，尚未見胰腺癌組織miRNA聯(lián)合糖尿病史及CA125情況進行胰腺癌肝轉移預測情況的相關研究。

發(fā)明內容