[發明專利]一種果汁基因組DNA快速提取試劑盒

在審

• 申請號: 202310013456.0
• 申請日: 2023-01-05
• 公開（公告）號: CN116574721A
• 公開（公告）日: 2023-08-11
• 發明（設計）人: 邢冉冉;陳穎;王琳;張九凱;鄧婷婷;于寧
• 申請（專利權）人: 中國檢驗檢疫科學研究院
• 主分類號: C12N15/10
• 分類號: C12N15/10;C12Q1/6806
• 代理公司: 北京天盾知識產權代理有限公司 11421
• 代理人: 丁敬博

本發明涉及一種果汁基因組DNA提取試劑盒，所述試劑盒包括DNA裂解液、DNA清洗液1、DNA清洗液2和圓形濾紙片，所述DNA裂解液包括鹽酸胍、聚乙烯吡咯烷酮、Tris?HCl、EDTA和Triton?X?100，所述DNA清洗液1包括鹽酸胍和Tris?HCl，所述DNA清洗液2包括Tris?HCl和NaCl。本發明的果汁基因組DNA提取試劑盒具有提取時間短、成本低、通用性強、安全性和環保性高等特點，為實現果汁現場快速真偽鑒別提供了技術支撐。

技術領域

本發明屬于分子生物學領域，具體涉及一種果汁基因組DNA快速提取試劑盒。

背景技術

果汁是以水果為原料，采用物理方法制成的可發酵但未發酵的汁液、漿液制品，或在濃縮果汁中加入其加工過程中除去的等量水分還原制成的汁液、漿液制品。果汁中富含維生素、礦物質、糖分、膳食纖維等，具有促消化、潤腸道、預防腫瘤多種優點，出于對果汁營養價值的考慮，年輕一代果汁需求量越來越大。預計到2023年，果汁銷量將達到368098億升。隨著全球貿易的發展，在經濟利益的驅動下，國際市場上高達80％的果汁存在摻假問題。為保護消費者權益，維護果汁市場秩序，建立快速、準確的鑒別方法勢在必行。

基于DNA的分子生物學技術不受原料產地、環境、加工方式等外在因素的影響，可對果汁產品中水果成分的種、屬進行鑒定，具有靈敏度高、特異性強、簡便快捷等優點。但果汁中含有大量的碳水化合物和次生物質(色素、酚類以及果膠等)會對DNA提取以及PCR擴增造成干擾和抑制作用。另外，DNA提取過程中某些殘留雜質的基質效應也會影響后續的分子操作。因此高效、快速的DNA提取方法的建立是應用分子生物學技術進行果汁現場、快速鑒偽的關鍵步驟。

關于基因組DNA的快速提取已有相關學者應用堿解法、磁珠法、纖維素膜片吸附法、濾紙法、棉簽法、硅膠膜離心柱法、磁性納米微球法等方法展開對菠菜、大白菜、肉制品、黃瓜、中藥材、植物葉片、黃秋葵、玉米干種子等樣品的基因組DNA快速提取研究。但是目前尚未有開展針對果汁基因組DNA快速提取的相關研究。

發明內容

本發明的目的在于提供一種果汁基因組DNA快速提取試劑盒及對應的快速提取方法，本發明的試劑盒具有提取時間短、成本低、通用性強、環保的特點，為實現果汁現場快速真偽鑒別提供技術支撐。

為實現上述發明目的，本發明第一方面提供了一種果汁基因組DNA提取試劑盒，所述試劑盒包括DNA裂解液、DNA清洗液1、DNA清洗液2和圓形濾紙片，所述DNA裂解液包括鹽酸胍、聚乙烯吡咯烷酮、Tris-HCl、EDTA和Triton-X-100，所述DNA清洗液1包括鹽酸胍和Tris-HCl，所述DNA清洗液2包括Tris-HCl和NaCl。

優選的，所述DNA裂解液包括1-15M鹽酸胍、0.2-5％聚乙烯吡咯烷酮(重量百分比)、30-80mM?Tris-HCl、5-50mM?EDTA和5-50mM?Triton-X-100。

更優選的，所述DNA裂解液包括6-10M鹽酸胍、0.5-2％聚乙烯吡咯烷酮(重量百分比)、40-60mM?Tris-HCl、10-30mM?EDTA和10-30mM?Triton-X-100。

進一步優選的，所述DNA裂解液包括8M鹽酸胍、1％聚乙烯吡咯烷酮(重量百分比)、50mM?Tris-HCl、20mM?EDTA和21.3mM?Triton-X-100。

優選的，所述聚乙烯吡咯烷酮為PVP-40。

優選的，所述DNA清洗液1包括1-15M鹽酸胍和30-80mM?Tris-HCl。

更優選的，所述DNA清洗液1包括6-10M鹽酸胍和40-60mM?Tris-HCl。

進一步優選的，所述DNA清洗液1包括8-10M鹽酸胍和50-60mM?Tris-HCl。