[發明專利]含有丙氨酰谷氨酰胺的復方氨基酸藥物組合物中雜質的檢測方法

在審

• 申請號: 202211743456.8
• 申請日: 2022-12-30
• 公開（公告）號: CN115932113A
• 公開（公告）日: 2023-04-07
• 發明（設計）人: 黃嶺;胡金濤;付夢玲;張民;周程;吳俊
• 申請（專利權）人: 遠大生命科學（武漢）有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/32;G01N30/34;G01N30/60
• 代理公司: 北京泛華偉業知識產權代理有限公司 11280
• 代理人: 郭廣迅

本發明提供一種含有丙氨酰谷氨酰胺的復方氨基酸藥物組合物中雜質的檢測方法，其采用高效液相色譜法，所述高效液相色譜法的條件包括：采用以氨基丙基三乙氧基硅烷鍵合硅膠或氨基丙基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，以體積比為(25～45)：(75～55)的磷酸二氫鉀緩沖液?乙腈為流動相；其中，所述磷酸二氫鉀緩沖液的濃度為0.001～0.03mol/L；所述磷酸二氫鉀緩沖液用磷酸調節pH至2.5～5.5。該方法可同時檢測丙氨酰谷氨酰胺降解雜質和復方氨基酸降解雜質，且供試品溶液無需復雜前處理過程，方法簡便、快速、準確。

技術領域

本發明屬于分析化學領域。具體地，本發明涉及一種含有丙氨酰谷氨酰胺的復方氨基酸藥物組合物中雜質的檢測方法。

背景技術

丙氨酰谷氨酰胺是腸外營養產品中非常重要的一種雙肽氨基酸，進入人體后可快速分解為丙氨酸和谷氨酰胺，且無毒副作用，其在腸外營養產品中的應用日益受到關注。但丙氨酰谷氨酰胺注射液是一種高濃度溶液，不可直接輸注，其在輸注前必須與可配伍的氨基酸或含有氨基酸的輸液相混合，然后與載體溶液一起輸注。配伍溶液關鍵質量控制指標包括丙氨酰谷氨酰胺降解雜質和復方氨基酸降解雜質的考察。對于成分復雜的配伍溶液來說，丙氨酰谷氨酰胺的主要降解雜質為L-焦谷氨酸、環-(L-丙氨酰-L-谷氨酰胺)、L-焦谷氨酰-L-丙氨酸和L-丙氨酰-L-谷氨酸，使用常規的高效液相色譜法檢測時上述四種物質會受氨基酸溶液(18AA)復雜組分的干擾。而且配伍溶液中復方氨基酸注射液的降解雜質蛋氨酸亞砜對男性肝細胞具有一定的毒性損傷作用，也需重點控制。

Simone等人使用LC-ESI-MS/MS對腸外氨基酸注射液中的丙氨酰谷氨酰胺雜質進行檢測，但是LC-ESI-MS/MS設備昂貴，一般的實驗室不具備該條件。Simone等人還使用二維反向色譜×HILIC分離模式，IT-MS與CAD做檢測器，分析腸外氨基酸注射液中的丙氨酰谷氨酰胺雜質，該法同樣設備昂貴，操作復雜，一般實驗室不具備該條件。

中國專利申請CN111812259A公開一種復方氨基酸注射液中丙氨酰谷氨酰胺雜質的檢測方法，其以親水改性的烷基硅烷化學鍵合硅膠柱，以磷酸氫二銨為流動相，該方法中供試品溶液的制備需使用陽離子交換樹脂吸附去除復方氨基酸注射液中的氨基酸組分，樣品前處理操作復雜。

中國專利申請CN106248853A公開的測定復方氨基酸注射液的降解雜質蛋氨酸亞砜的含量的方法以及邵天舒等人提供的《鄰苯二甲醛柱前衍生化-HPLC測定復方氨基酸注射液中蛋氨酸亞砜的含量》的檢測方法均需進行復雜的柱前衍生化，衍生化試劑鄰苯二甲醛極易氧化，從而影響測定的重復性與準確性。

綜上，1)當前沒有同時分離測定配伍溶液中復方氨基酸雜質和丙氨酰谷氨酰胺雜質的相關報道；2)采用質譜類儀器對配伍溶液中的丙氨酰谷氨酰胺雜質進行檢測，設備價格昂貴，一般的實驗室不具備該條件；3)現有高效液相色譜法檢測配伍溶液中丙氨酰谷氨酰胺雜質，由于復雜氨基酸組分(18AA)的干擾，需采用陽離子交換樹脂吸附去除復方氨基酸注射液中的氨基酸組分，樣品前處理操作復雜；4)測定配伍溶液中復方氨基酸降解雜質需進行復雜的柱前衍生化或者用到離子對試劑。

因此，需要建立一種科學有效、易于操作且能同時分離測定配伍溶液中復方氨基酸雜質和丙氨酰谷氨酰胺雜質的方法，既可降低檢測成本、減輕勞動強度又節能環保。

發明內容

針對以上問題，本發明的目的是提供一種含有丙氨酰谷氨酰胺的復方氨基酸藥物組合物中雜質的檢測方法。該方法可同時檢測丙氨酰谷氨酰胺降解雜質和復方氨基酸的其他降解雜質，且供試品溶液無需復雜前處理過程，方法簡便、快速、準確。

本發明的上述目的是通過提供以下技術方案實現的：

本發明提供一種含有丙氨酰谷氨酰胺的復方氨基酸藥物組合物中雜質的檢測方法，其采用高效液相色譜法，所述高效液相色譜法的條件包括：