[發明專利]一種用于海水魚類肌肉干細胞快速分化的分化誘導培養基在審
| 申請號： | 202211615748.3 | 申請日： | 2022-12-15 |
| 公開（公告）號： | CN115820549A | 公開（公告）日： | 2023-03-21 |
| 發明（設計）人： | 郭華榮;薛霆 | 申請（專利權）人： | 中國海洋大學 |
| 主分類號： | C12N5/077 | 分類號： | C12N5/077 |
| 代理公司： | 北京識然知識產權代理事務所(普通合伙) 11975 | 代理人： | 曾慶國 |
| 地址： | 266100 山*** | 國省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 用于 海水 魚類 肌肉 干細胞 快速 分化 誘導 培養基 | ||
1.一種用于海水魚類肌肉干細胞體外分化的分化誘導培養基，其特征在于，所述的分化培養基是添加有2％間充質干細胞專用胎牛血清、維生素C、維生素D和胰島素的L-15基礎培養基。
2.如權利要求1所述的分化誘導培養基，其特征在于，所述的維生素C濃度為100-400μmol/L。
3.如權利要求1所述的分化誘導培養基，其特征在于，所述的維生素D濃度為50-300nmol/L。
4.如權利要求1所述的分化誘導培養基，其特征在于，所述的胰島素濃度為0.1-10μg/mL。
5.如權利要求1所述的分化誘導培養基，其特征在于，所述的分化誘導培養基中還添加有抗生素。
6.如權利要求5所述的分化誘導培養基，其特征在于，所述的添加有抗生素，是添加1.0×105IU/L青霉素鈉和100mg/L鏈霉素。
7.如權利要求1所述的分化誘導培養基，其特征在于，所述的分化誘導培養基是添加有終濃度為2％間充質干細胞專用胎牛血清、終濃度為200μmol/L的維生素C、終濃度為100nmol/L的維生素D和終濃度為10μg/mL的胰島素的L-15基礎培養基。
8.權利要求1-7任一項所述的分化誘導培養基在誘導海水魚類肌肉干細胞分化中的應用。
9.一種誘導海水魚類肌肉干細胞快速分化的方法，其特征在于，所述的方法使用權利要求1-7任一項所述的分化誘導培養基來培養海水魚類肌肉干細胞。
10.如權利要求9所述的方法，其特征在于，所述的方法包括如下的步驟：
S1：分離得到海水魚類肌肉干細胞；
S2：將海水魚類肌肉干細胞接種到細胞培養板中，于魚類肌肉干細胞培養基中培養，將海水魚類肌肉干細胞培養至密度達到90％以上；
S3：吸去海水魚類肌肉干細胞培養基，用PBS潤洗一遍，加入所述的分化誘導培養基，繼續培養，誘導海水魚類肌肉干細胞的分化；
S4：每隔2天，用所述的分化誘導培養基對海水魚類肌肉干細胞進行換液，繼續培養，直至海水魚類肌肉干細胞分化為成肌細胞，并相互融合形成肌管以及分化形成肌纖維。
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