[發明專利]一種含有復合免疫增強劑的H9N2禽流感-新城疫二聯滅活疫苗的制備與應用

在審

• 申請號: 202211470718.8
• 申請日: 2022-11-23
• 公開（公告）號: CN115721708A
• 公開（公告）日: 2023-03-03
• 發明（設計）人: 馮華朋;舒建洪;張金鴿;張興;陳文浩;陳燕濤;何玉龍;查銀河
• 申請（專利權）人: 浙江理工大學紹興生物醫藥研究院有限公司;浙江洪晟生物科技股份有限公司;浙江理工大學
• 主分類號: A61K39/17
• 分類號: A61K39/17;A61K39/145;A61K39/39;A61P31/16;A61P31/14
• 代理公司: 浙江納祺律師事務所 33257
• 代理人: 王士祥

本發明公開的是一種含有復合免疫增強劑的H9N2禽流感?新城疫二聯滅活疫苗的制備與應用，免疫增強劑含有的羥丙基纖維素的左旋咪唑和黃芪多糖。一種含有該免疫增強劑的滅活疫苗的制備方法如下：將該免疫增強劑與滅活抗原、吐溫?80混合，制備成水相溶液；將白油、司班和硬脂酸鋁混合，得到油相溶液；將油相溶液與水相溶液混合，即可得到滅活疫苗。該發明中所包含的免疫增強劑與疫苗中的其他組分之間具有正向導向性，具有增加難溶性藥物的溶出度，提高這類藥物的生物利用度，延長抗原在機體內的停留時間，達到緩釋目的，來保持對免疫系統的持續激活作用，進而提高細胞免疫和體液免疫功能，增強免疫后機體的抗體水平，增強免疫效果。

技術領域

本發明涉及一種動物疫苗的制備和應用，更具體一點說，涉及一種含有復合免疫增強劑的H9N2禽流感-新城疫二聯滅活疫苗的制備與應用，屬于免疫佐劑領域。

背景技術

雞新城疫(Newcastle disease,ND)是由副黏病毒科副黏病毒屬的新城疫病毒(Newcastle disease virs,NDV)感染引起的高度接觸性傳染性疾病，又稱亞洲雞瘟。伴有呼吸困難，高熱，黏膜出血，神經紊亂，運動失調等疾病特征。雞新城疫疾病具有傳播速度快、發病率和病死率高等特征,對家禽業產生巨大的影響,造成不可估量的損失。世界動物衛生組織(Office International Des Epizooties,OIE)將其列為A類疫病。

禽流感是由正黏病毒科亞洲A型流感病毒(Avian inflenza virs,AIV)感染引起的由呼吸系統至全身敗血癥等多種病癥的傳染病。主要有發熱、采食量下降、呼吸困難、肺出血、肌肉痛等疾病特征，主要發生在冬、春季節。禽流感病毒的多種亞型，多種傳播渠道，造成了禽類大規模傳染，給養雞業帶來了巨大經濟損失，同時也嚴重危害公共衛生安全。

在禽養殖的過程中，為控制傳染源，切斷傳播途徑，保證養殖產量，使用疫苗免疫接種是控制禽流感疫情發生和流行的有效措施，家禽免疫接種疫苗后能夠有效減少機體向外界的排毒量，在增加抵抗力的同時降低病毒傳播的風險，對禽流感的防控起到了積極作用。滅活疫苗的高安全性和強免疫效果，是一種良好的疫苗免疫選擇項。但是油乳劑滅活疫苗與活疫苗相比，免疫保護產生較慢，因此生產上需要進行疫苗增強劑的開發，達到延長抗原在機體內的存在時間和保持對免疫系統的持續激活作用。因此近年來尋找有效增強機體的細胞/體液免疫應答的免疫增強劑成為研究熱點。

羥丙基纖維素(hydroxypropyl cellulose,簡稱HPC)，是纖維素羥丙基化的產物。是纖維素與氫氧化鈉溶通過醚化反應后得到羥丙基纖維素。Qi X等研究發現HPC顯示出良好的漂浮特性，延長了藥物在胃部的停留時間，并提高了相對生物利用度。Bielska D研究HPC納米微球包裹姜黃素，具有熱敏性，可作為緩控釋劑。Sarode A L等以HPC為載體，發現它起到促溶劑的作用，可以增加難溶性藥物的溶出度并且能夠提高這類藥物的生物利用度。研究還發現，添加HPC的藥物制劑可增加高溶性和低滲透性藥物的鼻吸收作用。因此，HPC在醫藥領域的應用開拓非常重要。

左旋咪唑(levamisole,簡稱LMS)，由消旋四咪唑與d-樟腦-10-磺酸環合，再水解成鹽而得。或由DL-四咪唑經拆分，用燒堿中和，得到L-四咪唑，最后成鹽而得。LMS能促進EAE大鼠脊髓內單個核細胞上CD4和CD28的表達，提示LMS上調CD4和CD28的表達。左旋咪唑作為一種免疫調節劑，具有增強雞細胞免疫和體液免疫功能的作用，左旋咪唑可使CD4^+/CD8^+淋巴細胞比值明顯升高。