[發(fā)明專利]TCR或其抗原結(jié)合片段及其應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202211449513.1
• 申請(qǐng)日: 2022-11-18
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN116063577A
• 公開(kāi)（公告）日: 2023-05-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉勝春;金艾順;申美瑩;韓曉建;陳思吟
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 重慶醫(yī)科大學(xué);馮玉林
• 主分類號(hào): C07K19/00
• 分類號(hào): C07K19/00;C12N15/13;A61K35/17;A61P35/00;G01N33/574
• 代理公司: 重慶西南華渝專利代理有限公司 50270
• 代理人: 馮曉超

本發(fā)明屬于T細(xì)胞免疫治療藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種T細(xì)胞受體(TCR)或其抗原結(jié)合片段及其應(yīng)用，該TCR包含如SEQ?ID?NO:37所示序列。該TCR對(duì)TP53?G245S突變具有很強(qiáng)的特異性，而且能介導(dǎo)T細(xì)胞分泌大量的IFN?γ細(xì)胞因子和/或促進(jìn)CD107a表達(dá)并殺死發(fā)生TP53?G245S基因突變的腫瘤細(xì)胞。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于T細(xì)胞免疫治療藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種TCR或其抗原結(jié)合片段及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

隨著生物醫(yī)藥領(lǐng)域研究的進(jìn)展，靶向惡性實(shí)體瘤的T細(xì)胞免疫治療的靶點(diǎn)選擇在不斷演變，從最初的譜系抗原變成了病毒抗原，而隨著近年來(lái)高通量測(cè)序技術(shù)的出現(xiàn)，靶向腫瘤個(gè)體突變成為了新一代T細(xì)胞治療聚焦的靶點(diǎn)。T細(xì)胞治療目前主要包括TCR-T和CAR-T治療手段。目前CAR-T技術(shù)治療在白血病、淋巴病瘤等血液瘤的治療中起到顯著效果，大大提高了患者生存率和生存質(zhì)量，但是針對(duì)實(shí)體瘤，CAR-T治療手段由于目前的特異性靶點(diǎn)有限，大大限制了其應(yīng)用前景。TCR-T技術(shù)不同于CAR-T細(xì)胞技術(shù)，TCR是所有T細(xì)胞表面的特征性標(biāo)志，以非共價(jià)鍵與CD3結(jié)合，形成TCR-CD3復(fù)合物。外周血中，90％-95％的T細(xì)胞表達(dá)TCR，經(jīng)過(guò)基因改造的TCR的T細(xì)胞，可以對(duì)腫瘤細(xì)胞表面上的抗原分子進(jìn)行特異性識(shí)別，進(jìn)而針對(duì)腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生免疫反應(yīng)。

目前，在人類癌癥中，TP53基因?yàn)槟[瘤學(xué)領(lǐng)域最著名的抑癌基因之一，大部分的腫瘤會(huì)發(fā)生TP53基因突變。所以，一種可以與TP53突變多肽特異性結(jié)合，并能介導(dǎo)T細(xì)胞對(duì)TP53突變的腫瘤細(xì)胞進(jìn)行殺滅的TCR是有必要的。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明目的之一在于提供一種TCR，可以靶向特異性識(shí)別TP53-G245S突變位點(diǎn)，與TP53-G245S突變的多肽與HLA的復(fù)合體特異性結(jié)合，從而刺激T細(xì)胞活化，介導(dǎo)T細(xì)胞分泌IFN-γ等細(xì)胞因子，進(jìn)而殺傷表達(dá)TP53-G245S突變基因的腫瘤細(xì)胞。該TCR或其抗原結(jié)合片段對(duì)TP53-G245S突變的多肽特異性強(qiáng)，而且能介導(dǎo)T細(xì)胞分泌大量的IFN-γ細(xì)胞因子，殺滅TP53-G245S突變的腫瘤細(xì)胞。

本發(fā)明一方面提供了一種TCR，可以從以下兩種TCR進(jìn)行選擇：

第一種：TCR的α鏈可變區(qū)可以包含如SEQ?ID?NO:3所示序列的α鏈CDR3，TCR的β鏈可變區(qū)包含如SEQ?ID?NO:12所示序列的β鏈CDR3。

第二種：TCR可以包含如SEQ?ID?NO:37所示序列。

本發(fā)明另一方面提供了一種抗原結(jié)合片段，可以包含上述兩種TCR中的任意一種。

本發(fā)明再一方面提供了一種多核苷酸，可以從以下兩種多核苷酸進(jìn)行選擇：

第一種：可以包含如SEQ?ID?NO:21和SEQ?ID?NO:30所示序列。

第二種：可以包含如SEQ?ID?NO:38所示序列。

本發(fā)明再一方面提供了一種表達(dá)載體，可以包含上述兩種多核苷酸中任意一種。

本發(fā)明再一方面提供了一種工程細(xì)胞，可以包含上述的表達(dá)載體。

本發(fā)明再一方面提供了一種藥物組合物，可以包含上述的TCR或上述的抗原結(jié)合片段或上述的多核苷酸或上述的表達(dá)載體或上述的工程細(xì)胞，和藥學(xué)上可接受的載體和/或稀釋劑。

本發(fā)明再一方面提供了一種上述的TCR或上述的抗原結(jié)合片段或上述的多核苷酸或上述的表達(dá)載體或上述的工程細(xì)胞在制備用于提高T細(xì)胞分泌IFN-γ水平和/或促進(jìn)CD107a表達(dá)藥物中的應(yīng)用。

本發(fā)明再一方面提供了一種上述的TCR或上述的抗原結(jié)合片段或上述的多核苷酸或上述的表達(dá)載體或上述的工程細(xì)胞在制備用于檢測(cè)表達(dá)TP53-G245S突變的腫瘤細(xì)胞試劑或試劑盒中的應(yīng)用。