[發明專利]一種多價腦膜炎球菌多糖結合疫苗的制備方法

在審

• 申請號: 202211325503.7
• 申請日: 2022-10-27
• 公開（公告）號: CN115671275A
• 公開（公告）日: 2023-02-03
• 發明（設計）人: 黃杰;姚永鵬;魏鑫;張子昌;李松;孫俊;朱慧;侯文禮
• 申請（專利權）人: 成都康華生物制品股份有限公司
• 主分類號: A61K39/385
• 分類號: A61K39/385;A61K39/095;A61P31/04;C07K14/34;C07K1/107
• 代理公司: 成都東唐智宏專利代理事務所(普通合伙) 51261
• 代理人: 羅言剛

1.一種多價腦膜炎球菌多糖結合疫苗的制備方法，包括：將多糖衍生化獲得多糖-ADH衍生物，再將多糖-ADH衍生物與蛋白結合，最后對產物進行分離純化，其特征在于，所述多糖衍生物與蛋白結合步驟具體為：將多糖-ADH衍生物與白喉類毒素突變體CRM197在縮合劑4-(4,6-二甲氧基三嗪)-4-甲基嗎啉鹽酸鹽DMTMM的作用下進行縮合反應，其中白喉類毒素突變體CRM197濃度為3～4毫克/毫升，DMTMM的濃度為10～30毫克/毫升，反應溶液調pH值為5.5～6.5，多糖-ADH衍生物與白喉類毒素突變體CRM197質量比為1：1。

2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，多糖衍生化步驟中，需將反應溶液調節pH值為9.0～10.0。

3.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，調節pH值9.0～10.0具體方式為：加入多糖溶液等體積的NH₃-NH₄Cl緩沖溶液，所述NH₃-NH₄Cl溶液濃度范圍為0.1-0.3mol/L。

4.根據權利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述NH₃-NH₄Cl溶液濃度為0.1mol/L。

5.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，多糖衍生物與蛋白結合步驟中，調pH值為5.5～6.5具體為：在加入反應物后，加入與白喉類毒素突變體CRM197蛋白溶液等體積的磷酸鹽緩沖液，所述磷酸鹽緩沖液濃度范圍為0.1-0.3mol/L。

6.根據權利要求5所述的制備方法，其特征在于，所述磷酸鹽緩沖液濃度為0.2mol/L。

7.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，DMTMM的濃度為10毫克/毫升。