[發(fā)明專利]一種依替巴肽的制備方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202211312908.7
• 申請日: 2022-10-25
• 公開（公告）號: CN115477688A
• 公開（公告）日: 2022-12-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王敏錦;宋志英;朱寧;羅霞;段陳平
• 申請（專利權(quán)）人: 山西德元堂藥業(yè)有限公司
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K1/16;C07K1/06;C07K1/04
• 代理公司: 北京維正專利代理有限公司 11508
• 代理人: 柯胡成

本申請涉及一種依替巴肽的制備方法。所述方法包括以下步驟：S1，以替代度為2.0~9.1 mmol/g的Fmoc?Rink Amide氨甲基樹脂為載體，采用Fmoc固相多肽逐步縮合法，從N端至C端，將Fmoc?Gly?OH、Fmoc?Pro?OH、Fmoc?Trp(Boc)?OH、Fmoc?Asp(OtBu)?OH、Fmoc?Gly?OH、Fmoc?HomoArg(Boc)2?OH和三苯甲基巰基丙酸依次活化偶聯(lián)至所述載體上，其間依次脫去Fmoc保護(hù)基團(tuán)，得到依替巴肽樹脂肽；S2，對依替巴肽樹脂肽進(jìn)行裂解后，經(jīng)沉降、洗滌和干燥得到依替巴肽直鏈肽；S3，將依替巴肽直鏈肽的水溶液與氧化劑混合，進(jìn)行環(huán)化反應(yīng)，獲得依替巴肽粗品；S4，對依替巴肽粗品進(jìn)行純化，獲得依替巴肽。所述方法的合成步驟簡單，降低了原料成本，且制得的依替巴肽的收率和純度均較為優(yōu)異。

技術(shù)領(lǐng)域

本申請涉及多肽合成技術(shù)領(lǐng)域，尤其是涉及一種依替巴肽的制備方法。

背景技術(shù)

依替巴肽，又名依非巴特，英文名為Eptifibatide，分子式為：C₃₅H₄₉N₁₁O₉S₂，分子量為831.96。化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下：

依替巴肽是一種人工合成的含一個(gè)巰基丙酸和六個(gè)氨基酸殘基的環(huán)肽。它是一種具有特異針對性的血小板糖蛋白GP II b/IIIa受體拮抗劑，選擇性、可逆性抑制血小板聚集的最終共同通路(血漿凝血因凝血因子Ⅰ與GPⅡb/Ⅲa結(jié)合)，可逆轉(zhuǎn)因血栓形成而導(dǎo)致的缺血狀態(tài)。依替巴肽臨床上主要用于治療不穩(wěn)定性心絞痛，急性心肌梗死，其主要的不良反應(yīng)是出血，大多數(shù)出血為輕中度出血，最主要的出血部位為PCI時(shí)血管刺穿部位，腦出血少見。依替巴肽最早由美國COR Therapeuties公司研發(fā)，1998年7月以Integrelin為商品名在美國首次上市。

專利號為CN102040652A的中國專利報(bào)道了依替巴肽的一種固液合成法，采按照Fmoc法合成五肽樹脂H-Gly-Asp(OtBu)-Trp(Boc)-Pro-Cys(Trt)-RinkAM，將Trt-Mpa-Har(Boc)2-OH和五肽樹脂鍵合得肽樹Trt-Mpa-Har(Boc)2-Gly-Asp(OtBu)-Trp(Boc)-Pro-Cys(Trt)-RinkAM，裂解后經(jīng)碘氧化得依替巴肽粗品，再經(jīng)離子交換樹脂純化后得依替巴肽。該反應(yīng)周期長，產(chǎn)品純度低，不利于大規(guī)模生產(chǎn)。

專利號為CN102584944B的中國專利中公開了一種依非巴特的制備方法，其過程是在氨基樹脂上通過固相偶聯(lián)合成法依次接入下列序列中相對應(yīng)的保護(hù)氨基酸或片段，得到依非巴特樹脂：X-Y-Trp(R1)-Pro-Cys(R2)-氨基樹脂；其中X為Mpr(Trt)-Harg；Y為Gly-Asp(OtBu)。在該專利中，將四個(gè)保護(hù)氨基酸按照順序位置關(guān)系形成兩個(gè)二肽片段。該制備方法復(fù)雜，不利于大規(guī)模生產(chǎn)。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決現(xiàn)有技術(shù)的不足，本申請?zhí)峁┮环N新的依替巴肽的制備方法，所述方法的合成步驟簡單，采用最小保護(hù)策略，降低了原料成本，且制得的依替巴肽的收率和純度均較為優(yōu)異。

為此，本申請第一方面提供了一種依替巴肽的制備方法，所述方法包括以下步驟：

S1，以替代度為2.0～9.1mmol/g的Fmoc-Rink Amide氨甲基樹脂為載體，采用Fmoc固相多肽逐步縮合法，從N端至C端，將Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Trp(Boc)-OH、Fmoc-Asp(OtBu)-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-HomoArg(Boc)2-OH和三苯甲基巰基丙酸依次活化偶聯(lián)至所述載體上，其間依次脫去Fmoc保護(hù)基團(tuán)，得到依替巴肽樹脂肽；

S2，對所述依替巴肽樹脂肽進(jìn)行裂解后，經(jīng)沉降、洗滌和干燥得到依替巴肽直鏈肽；

S3，將所述依替巴肽直鏈肽的水溶液與氧化劑混合，進(jìn)行環(huán)化反應(yīng)，獲得依替巴肽粗品；

S4，對所述依替巴肽粗品進(jìn)行純化，獲得依替巴肽。