[發(fā)明專利]一種用于痕量毒品檢測的人體毛發(fā)裂解液及其應用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202211271459.6
• 申請日: 2022-10-18
• 公開（公告）號: CN115628951A
• 公開（公告）日: 2023-01-20
• 發(fā)明（設計）人: 蔣維嘉
• 申請（專利權）人: 南京火眼金睛安全科技有限公司
• 主分類號: G01N1/28
• 分類號: G01N1/28;G01N33/48
• 代理公司: 南京聚匠知識產權代理有限公司 32339
• 代理人: 盧強

本發(fā)明公開了一種用于痕量毒品檢測的人體毛發(fā)裂解液及其應用，屬于毒品檢測技術領域，包括以下組分：0.8?1.5mg/mL蛋白酶，0.5％?1.2％乙酸，2.6?7.8mg/mL亞硫酸氫鈉，2.9?4.1mg/mL氯化鈉，12.5?20mg/mL三(2?羧乙基)膦，0.5?1.5％異丙醇，0.5?1.5％聚乙二醇和pH4?7弱酸性緩沖液，其中，％為體積百分比，本發(fā)明通過改變介質環(huán)境，降低了毒品分子與角蛋白之間的相互作用力，促進毒品從角蛋白中釋放出來，進入裂解液介質，提高藥物的釋放量，從而增加后續(xù)檢測準確度。

技術領域

本發(fā)明涉及毒品檢測技術領域，具體涉及一種用于痕量毒品檢測的人體毛發(fā)裂解液及其應用。

背景技術

據統(tǒng)計，我國吸食新型毒品的人數(shù)每年增長30％左右，其中青少年占了86％。新型毒品的濫用造成了嚴重的個體危害和社會危害，為了有效打擊新型毒品犯罪，緊密配合公安等執(zhí)法部門的禁毒需要，分析工作者們建立了一系列準確、快速、高靈敏的定性定量分析檢測新型毒品的方法。而毛發(fā)作為毒品的一個特殊載體，具有其他檢材不可比擬的優(yōu)勢，取材容易，攜帶方便，易長期保存且毒品在毛發(fā)中代謝較慢可長期存在，因此毛發(fā)中毒品的分析已成為法庭科學和臨床分析的研究熱點，發(fā)揮著越來越重要的作用。毛發(fā)中的毒品主要位于毛發(fā)的角質層和髓質層內，和蛋白質結合在一起，因此在檢驗毛發(fā)中的毒品之前需要對毛發(fā)樣品進行前處理，將毒品從毛發(fā)中釋放出來，同時也要消除毛發(fā)外部的油脂、汗液以及各種污染物。

現(xiàn)有技術中，對毛發(fā)處理的方法分為酸處理法和堿處理法，堿處理法例如專利CN110208072 B公開的由堿性蛋白酶、巰基乙酸、甘氨酸、三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽緩沖液、氯化鈉氫氧化鈉緩沖液、聚乙二醇辛基苯基醚和二硫蘇糖醇組成的快速毛發(fā)裂解液，其中，堿性蛋白酶用于在堿性條件下水解蛋白質肽鍵，分解角蛋白，釋放出毒品小分子；巰基乙酸、二硫蘇糖醇作為還原劑對提高角蛋白酶的活性具有促進作用；甘氨酸、三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽緩沖液、氯化鈉氫氧化鈉緩沖液等提供合適的裂解環(huán)境；聚乙二醇辛基苯基醚用于溶解脂質，以增加細胞膜對抗體的通透性。以含巰基的化合物作為還原劑時，含巰基的還原劑有一定的毒性，伴隨著異味，為了保證二硫鍵的破壞程度，含單巰基的還原劑通常需要過量，含雙巰基還原性化合物例如二硫蘇糖醇(dithiothreitol，DTT)，還原效果好，但存在在溶液中難以保存的缺點，為了保證效果，DTT最好是現(xiàn)配現(xiàn)用。酸性條件下，常用的裂解還原為物為含磷的化合物，例如三(2-羧乙基)膦(Tris(2-carboxyethyl)phosphine，TECP，微溶于水，易于保存并且可以在無保護氣體的條件下進行操作)，對二硫鍵的還原能力強于DTT，pH耐受范圍廣。專利CN 101979428 B公開了一種動物毛發(fā)溶解劑及角蛋白溶液的制備方法和用途，以三(2-羧乙基)膦鹽酸鹽、三(2-氰乙基)膦或三正丁基膦為主成分，用于分離角蛋白。

在酸性乃至中性的條件下，存在藥物釋放不完全的問題，而毛發(fā)中毒品及其代謝物的含量很低，僅為ng/mg級，藥物釋放不完全將會影響檢測準確度。

發(fā)明內容

針對上述存在的技術不足，本發(fā)明的目的是提供一種用于痕量毒品檢測的人體毛發(fā)裂解液，其特征在于，包括以下組分：0.8-1.5mg/mL蛋白酶，0.5-1.2％乙酸，2.6-7.8mg/mL亞硫酸氫鈉，2.9-4.1mg/mL氯化鈉，12.5-20mg/mL三(2-羧乙基)膦，0.5-1.5％異丙醇，0.5-1.5％聚乙二醇和pH4-7弱酸性緩沖液，其中，％為體積百分比。

優(yōu)選地，包括以下組分：0.9-1.1mg/mL蛋白酶，0.7-1.0％乙酸，3.6-4.2mg/mL亞硫酸氫鈉，3.5-4.1mg/mL氯化鈉，16.6-18.7mg/mL三(2-羧乙基)膦，1.1-1.5％異丙醇，1.1-1.5％聚乙二醇和pH4-7弱酸性緩沖液，其中，％為體積百分比。優(yōu)選地，所述pH4-7弱酸性緩沖液為0.01-1mol/L的磷酸鹽緩沖液、檸檬酸緩沖液、醋酸緩沖液、磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液中的至少一種，緩沖液為角蛋白催化分解，毛發(fā)表面處理提供適宜的環(huán)境，酸性條件下，有助于毛發(fā)表面油脂分解，酸性條件下，有效避免了進入裂解液的藥物與蛋白質再次進行結合。