[發明專利]一種用于人或動物的核酸快速提取試劑盒及其應用

在審

• 申請號: 202211260548.0
• 申請日: 2022-10-14
• 公開（公告）號: CN115386577A
• 公開（公告）日: 2022-11-25
• 發明（設計）人: 夏江;高學娟
• 申請（專利權）人: 領航基因科技（杭州）有限公司
• 主分類號: C12N15/10
• 分類號: C12N15/10;C12Q1/6806
• 代理公司: 杭州匯和信專利代理有限公司 33475
• 代理人: 周竑

本發明提供一種用于人或動物的核酸快速提取試劑盒及其應用，包括向待測樣本中添加終體積的0.5％的SDS后渦旋震蕩并瞬時離心；在90℃下加熱一段時間后充分離心得到上清液，本方案僅需簡單地添加SDS和DEPC水且在簡單的操作條件下就可以快速提取人或動物樣本中的核酸，且核酸提取過程中由于雜質的添加少致使本方案的核酸提取效率極高。

技術領域

本發明涉及核酸提取領域，特別涉及一種用于人或動物的核酸快速提取試劑盒及其應用。

背景技術

隨著分子生物學技術的發展，精準治療越來越走近人們的視線。在臨床實踐中，精準醫療追求針對每個病人正確選擇和精確應用適宜的診療方法，實現醫源性損害最小化、醫療耗費最低化以及病患獲益最大化。精準治療建立在分子診斷的基礎上，而核酸提取在分子診斷的過程中占據著非常重要的地位。

目前用于核酸提取的方法主要有：溶液提取法、磁珠法和過柱法三種。

溶液型抽提是比較經典的提取方法，幾乎都含有去污劑(如SDS)和鹽(如Tris、EDTA、NaCl等)的作用，除了提供一個合適的裂解環境，還包括抑制樣品中的核酸酶在裂解過程中對核酸的破壞的抑制劑(如EDTA)、維持核酸結構的穩定的試劑(如NaCl)等。去污劑則是通過使蛋白質變性，破壞膜結構及解開與核酸相連接的蛋白質，從而實現核酸游離在裂解體系中。

磁珠法提取核酸的原理是運用納米技術對超順磁性納米顆粒的表面進行改良和表面修飾后，制備成超順磁性氧化硅納米磁珠。該磁珠能在微觀界面上與核酸分子特異性地識別和高效結合。利用二氧化硅包被的納米磁性微球的超順磁性，在Chaotropic鹽(鹽酸胍、異硫氰酸胍等)和外加磁場的作用下，從樣本中分離出DNA和RNA。

過柱法提取核酸是用于微量核酸分離純化的較為簡單的方法，其基本原理是利用裂解液促使細胞破碎，使細胞中的核酸釋放出來。把釋放出的核酸特異地吸附在特定的硅載體上，這種載體只對核酸有較強的親和力和吸附力，對其他生化成分如蛋白質、多糖、脂類則基本不吸附，因而在離心時被甩出柱子。再把吸附在特異載體上的核酸用洗脫液洗脫下來，分離得到純化的核酸。

這些方法不僅操作復雜、成本高而且因多重操作使得大量的核酸流失，最高提取效率只能達到30-40％。因此，目前急需要一種高效快速而且有不影響PCR擴增效率的核酸提取方法用于分子診斷。

發明內容

本發明的目的在于提供一種用于人或動物的核酸快速提取試劑盒及其應用，不僅提取成本低、操作簡單、耗時短、提取產物不影響PCR擴增，而且因為操作過程中不會引入核酸流失的步驟，提取效率也特別高。

為實現以上目的，本發明提供一種用于人或動物的核酸快速提取試劑盒，包括：SDS，所述SDS加入待測樣品后的終體積為0.5％。

另外，本方案提供該核酸快速提取試劑盒的應用方法，包括步驟：

向待測樣本中添加終體積的0.5％的SDS后渦旋震蕩并瞬時離心；

在90℃下加熱一段時間后充分離心得到上清液，所述上清液含有核酸。

在一些實施例中，所述待測樣本為人或者動物的血液樣本、痰液樣本、肺泡灌洗液樣本、組織液樣本、組織樣本、培養的細胞系樣本和石蠟組織樣本。

在一些實施例中，所述核酸包括DNA和/或RNA。

具體的，在一些實施例中，渦旋震蕩30S后瞬間離心。

在一些具體實施例中，90℃水浴或金屬浴加熱6min后在12000xg下離線2min。

本方案在提取人或動物的核酸樣本時僅需要SDS和DEPC水，不需要其他額外的試劑使得整體的提取成本極低，且操作也十分簡單，僅需在90℃下加熱6分鐘后再在12000g下離心2分鐘即可。另外，本方案還可用于任何形式的人或動物樣本的DNA和RNA提取，提取效率極高。