[發(fā)明專利]應(yīng)用LFD-RPA技術(shù)檢測(cè)菠蘿泛菌的引物、探針、試劑盒及其應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202211245221.6
• 申請(qǐng)日: 2022-10-12
• 公開（公告）號(hào): CN115948581A
• 公開（公告）日: 2023-04-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊雪;徐會(huì)永;臧昊昱;谷春艷;潘銳;戚仁德
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)與農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全研究所
• 主分類號(hào): C12Q1/689
• 分類號(hào): C12Q1/689;C12Q1/6844;C12N15/11;C12R1/01
• 代理公司: 廣州市華學(xué)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 44245
• 代理人: 高寧馨

1.一種應(yīng)用LFD-RPA技術(shù)檢測(cè)菠蘿泛菌的引物和探針，其特征在于：所述的引物基于菠蘿泛菌的一個(gè)假定蛋白Hypothetical?protein基因序列設(shè)計(jì)；所述的引物的上游引物Pa-F序列如SEQ?ID?No:1所示，所述的引物的下游引物Pa-R序列如SEQ?ID?No:2所示，所述的探針Pa-Probe序列如SEQ?ID?No:3所示。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用LFD-RPA技術(shù)檢測(cè)菠蘿泛菌的引物和探針，其特征在于：所述的引物的下游引物Pa-R的5’端用生物素Biotin標(biāo)記。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用LFD-RPA技術(shù)檢測(cè)菠蘿泛菌的引物和探針，其特征在于：所述的探針Probe的5’端用異硫氰酸熒光素FITC基團(tuán)標(biāo)記，其5’端起第33位與第34位堿基中標(biāo)記四氫呋喃THF，其3’端用磷酸基團(tuán)PHO標(biāo)記。

4.一種含有權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)所述的引物和探針的試劑盒。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的試劑盒，其特征在于：所述的試劑盒還包括LFD試紙條。

6.如權(quán)利要求1所述的引物和探針在菠蘿泛菌檢測(cè)中的應(yīng)用。

7.如權(quán)利要求1所述的引物和探針在制備用于檢測(cè)菠蘿泛菌的產(chǎn)品中的應(yīng)用。

8.如權(quán)利要求4所述的試劑盒在菠蘿泛菌檢測(cè)中的應(yīng)用。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的試劑盒在菠蘿泛菌檢測(cè)中的應(yīng)用，其特征在于：

其應(yīng)用的方法，包括以下步驟：

利用待測(cè)樣品的研磨液進(jìn)行LFD-RPA檢測(cè)；根據(jù)LFD試紙條的條帶確定待測(cè)樣品是否含有菠蘿泛菌。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的試劑盒在菠蘿泛菌檢測(cè)中的應(yīng)用，其特征在于：

根據(jù)LFD試紙條的條帶確定待測(cè)樣品是否含有菠蘿泛菌的方法為：如果LFD試紙條出現(xiàn)一條藍(lán)色條帶位于質(zhì)控區(qū)內(nèi)，一條紅色條帶位于檢測(cè)區(qū)，則結(jié)果為陽(yáng)性，表明待測(cè)樣品中含有菠蘿泛菌；如果LFD試紙條只出現(xiàn)一條藍(lán)色條帶，位于質(zhì)控區(qū)內(nèi)，則結(jié)果為陰性，表明待測(cè)樣品中不含有菠蘿泛菌。