[發(fā)明專利]利用人類線粒體ND6基因重組載體制備ND6蛋白及應(yīng)用在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202211227430.8 | 申請(qǐng)日： | 2022-10-09 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN116179597A | 公開（公告）日： | 2023-05-30 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 冀延春;王靜;陳加榮;管敏鑫 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 浙江大學(xué) |
| 主分類號(hào)： | C12N15/85 | 分類號(hào)： | C12N15/85;C12N9/02;A61K48/00;A61K38/44;A61P27/02 |
| 代理公司： | 杭州求是專利事務(wù)所有限公司 33200 | 代理人： | 趙杭麗 |
| 地址： | 310058 浙江*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 利用 人類 線粒體 nd6 基因 重組 載體 制備 蛋白 應(yīng)用 | ||
1.利用人類線粒體ND6基因重組載體制備ND6蛋白，其特征在于，所述人類ND6基因重組載體的基因序列從N端到C端依次為CMV啟動(dòng)子，線粒體靶向序列COX8A-MTS和優(yōu)化后的核密碼子編碼的人類線粒體ND6核苷酸序列。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用人類線粒體ND6基因重組載體制備ND6蛋白，其特征在于，所述人類ND6基因重組載體核苷酸序列為優(yōu)化后的核密碼子編碼的人類ND6基因，其核苷酸序列如SEQ?ID?NO:3所示，核密碼子編碼的ND6蛋白的氨基酸序列如SEQ?ID?NO:6所示，該載體能在突變細(xì)胞中表達(dá)野生型ND6蛋白，替代突變導(dǎo)致的ND6異常蛋白，進(jìn)而緩解m.14484TC突變導(dǎo)致的Leber遺傳性視神經(jīng)病變。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用人類線粒體ND6基因重組載體制備ND6蛋白，其特征在于，所述核密碼子編碼人類ND6基因的翻譯的ND6融合蛋白，其氨基酸序列如SEQ?ID?NO:6所示，所述線粒體靶向序列COX8A-MTS如SEQ?ID?NO:2所示，CMV啟動(dòng)子的核苷酸序列如SEQ?IDNO:1所示。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一所述的利用人類線粒體ND6基因重組載體制備ND6蛋白，其特征在于，所述重組載體的骨架載體為pAAV-ZsGreen質(zhì)粒，其序列如SEQ?ID?NO:4所示，所述重組載體為pAAV-ND6質(zhì)粒，其序列如SEQ?ID?NO:5所示。
5.權(quán)利要求1所述的人類ND6基因重組載體在制備ND6蛋白試劑盒中應(yīng)用。
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