[發明專利]高產赤蘚糖醇解脂耶氏酵母及其應用

在審

• 申請號: 202211150427.0
• 申請日: 2022-09-21
• 公開（公告）號: CN115584327A
• 公開（公告）日: 2023-01-10
• 發明（設計）人: 魏愛英;孟剛;趙春光;周曉群;田斌;王吉瑋
• 申請（專利權）人: 寧夏伊品生物科技股份有限公司
• 主分類號: C12N1/16
• 分類號: C12N1/16;C12N13/00;C12N15/01;C12P7/18;C12R1/645
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 董函竹

本發明公開了高產赤蘚糖醇解脂耶氏酵母及其應用。具體地公開了解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)YP060?3，其在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心的保藏編號為CGMCC No.25008。本發明采用ARTP技術對產赤蘚糖醇的解脂耶氏酵母W29進行誘變篩選獲得高產赤蘚糖醇且遺傳性能穩定的目標菌株A29，該突變菌株A29生成赤蘚糖醇的產量和轉化率均極顯著高于出發菌株W29(P＜0.01)，將其應用于赤蘚糖醇的合成，以提高赤蘚糖醇的轉化率，為赤蘚糖醇的工業化生產提供理論依據，具有顯著的技術優勢，對赤蘚糖醇發酵產業的發展具有重要的意義。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及高產赤蘚糖醇解脂耶氏酵母及其應用。

背景技術

赤蘚糖醇是一種自然界中廣泛存在的天然活性物質，學名1，2，3，4-四丁醇，分子式C₄H₁₀O₄，是一種分子量為122的四碳糖醇，其外觀為無氣味的白色結晶性粉末，具有爽口的甜味，熱值低，結晶性好，不易吸濕，高溫時穩定，在廣泛pH范圍內穩定，在口中溶解時有溫和的涼爽感等優點。國內外研究者已經對赤蘚糖醇的安全性進行了一系列的動物和臨床試驗，其結果表明赤蘚糖醇生物耐受性好，安全無毒，無致齲性，并且對糖尿病人安全，體內不發酵，不會引起腸胃不適。赤蘚糖醇因其具有良好的理化特性和生物學活性，在食品加工業，醫藥行業、日化行業等諸多領域有著極其廣泛的應用前景。

赤蘚糖醇的生產方法主要有三種，即生物提取法、化學合成法和微生物發酵法。相較而言，微生物發酵法因其生產條件溫和、產品質量穩定、食品安全性高而成為最為理想的赤蘚糖醇生產方法。目前，國內外均采用微生物發酵法大規模生產赤蘚糖醇，多由解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)經葡萄糖發酵制得。解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)是一種非常規酵母，菌落圓形、米黃色、褶皺、邊緣毛狀、質干，4.0-6.0mm。細胞單個、球形、卵形、臘腸形，有真、假菌絲。因其乙酰-CoA和NAD(P)H供應充足、蛋白糖基化水平低，主要用于生產蛋白、油脂、萜烯類、有機酸以及糖醇等。微生物發酵生產赤蘚糖醇的關鍵就是獲得高產的生產菌，優良菌種的選育對赤蘚糖醇的發酵生產來說至關重要，也是整個赤蘚糖醇發酵工業的核心。從自然界分離得到的野生菌種不論產量或質量均不適合工業生產要求，因此必須通過人工選育得到優良的菌種。

誘變技術一直以來都是菌種工作者的研究熱點，是育種的重要工具。常壓室溫等離子體(Atmospheric Room Temperature Plasma，ARTP)誘變是一種新興的誘變技術，與傳統的誘變方法如紫外誘變、化學誘變相比，ARTP可以在室溫常壓下高效誘導DNA三磷酸單核苷酸的磷酸根基團及聚核苷酸的堿基和核糖的鏈接鍵與磷酸二酯鍵斷裂，從而引發細胞SOS修復機制。SOS修復過程為一種高容錯率修復，因此修復過程中會產生種類豐富的錯配位點，并最終穩定遺傳進而形成突變株。ARTP對生物的遺傳物質損傷效果明顯、損傷機制豐富，可得到大量高突變體樣本，其操作安全、方便，因此已成為微生物誘變育種領域的研究熱點。

隨著世界范圍內低熱量健康飲食成為人們飲食消費的發展方向,尤其無熱量食品在世界范圍內的增長速度越來越快，赤蘚糖醇的用量逐年遞增，市場需求量也在不斷提高。鑒于此，篩選符合工業化生產的高產、穩定、高質量的赤蘚糖醇菌種，可以降低企業成本、增加企業利潤，對赤蘚糖醇發酵產業的發展具有重要的意義。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是如何提高赤蘚糖醇的產量。所要解決的技術問題不限于所描述的技術主題，本領域技術人員通過以下描述可以清楚地理解本文未提及的其它技術主題。

為解決上述技術問題，本發明首先提供了解脂耶氏酵母，所述解脂耶氏酵母為解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)YP060-3，其在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心的保藏編號為CGMCC No.25008。

本發明還提供了含有所述解脂耶氏酵母的培養物。