[發明專利]維生素D受體基因SNP檢測試劑盒及應用

在審

• 申請號: 202211130106.4
• 申請日: 2022-09-16
• 公開（公告）號: CN115851903A
• 公開（公告）日: 2023-03-28
• 發明（設計）人: 張延赤;馬英偉;孫利偉;王利武
• 申請（專利權）人: 長春市兒童醫院
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 長春市東師專利事務所 22202
• 代理人: 張鐵生;趙軍

本發明公開了維生素D受體基因SNP檢測試劑盒，它包括，所述維生素D受體基因的引物；所述的維生素D受體基因為維生素D受體FokI基因；維生素D受體基因SNP檢測體系，它包括：所述的維生素D受體基因SNP檢測試劑盒，PCR反應體系為：模板DNA 4μL，5′HS Taq buffer 4μL，F Primer 0.5μL，R Primer 0.5μL，熱啟動Taq DNA聚合酶0.1μL，dNTP 0.4μL，滅菌水定容至總體積20μL；對DLD患兒VDR基因SNP多態性進行檢測及分析，結果發現DLD與VDR FokI基因相關；提示DLD的發生發展與VDR FokI基因的SNP多態性相關。

技術領域

本發明屬于分子生物學和臨床醫學領域，具體涉及維生素D受體基因SNP檢測試劑盒及應用。

背景技術

語言障礙（developmental language disorder，DLD）是兒童時期常見的發育障礙性疾病之一，兒童中有9%存在語言障礙。專家認為其為復雜的神經心理學綜合征。語言障礙患兒除了語言缺陷外，往往還表現出情緒和行為等問題。語言障礙對兒童的學習、社交乃至整個社會都可能造成長期的負面影響。DLD 給社會、家庭和個人造成極大的精神和經濟負擔；倍受社會和家長的關注。語言障礙屬交流障礙范疇，包括表達性語言障礙和語言接受和表達障礙，病因復雜，發病機理不清。語言障礙為高度異質性疾病。探討DLD與VDR基因的相關性可為DLD病因、發病機理的研究提供科學依據；為DLD的治療開辟新的途徑。

維生素D受體（Vitamin D receptor，VDR）是類固醇激素受體超家族成員。VDR蛋白主要由DNA結合區、核定位區、轉錄激活區、配體結合區和二聚化功能區組成。依據VDR蛋白在細胞內的位置，將VDR 分為核受體、胞漿受體和膜受體。VDR的核受體在本質上是一種配體依賴的核轉錄調控因子，VDR與配體1α,25(OH)2D3 的結合主要通過1α,25(OH)2D3激活VDR 受到后發生磷酸化，然后 1α,25(OH)2D3-VDR 與維甲酸類受體 (retinoic Xreceptor, RXR) 二聚化形成1α,25(OH)2D3-VDR-RXR 復合物， 該復合物通過VDR 的 DNA結合區與靶基因啟動子區域的維生素D反應元件(vitamin D response element, VDRE)結合，招募多種轉錄調節因子，調控上百個含有VDREs的靶基因轉錄表達。核VDR表達下降或維生素D缺乏會引起 1α,25(OH)2D3-VDR 結合效應降低，導致轉錄活性和靶基因表達下降。VDR胞漿受體和膜受體在調節鈣離子水平及其下游信號通路中具重要作用。VDR能夠在細胞核和細胞漿之間穿梭，促進胞漿 VDR 向核的轉移可以增強對靶基因的調控。此外，1α,25(OH)2D3 作為類固醇激素，在腦組織也可以與腦細胞中的膜蛋白二硫鍵異構酶A3(protein disulfide isomerase family member 3,PDIA3) 結合，發揮非基因組作用。研究證實，成年大鼠、小鼠、倉鼠，以及成年人腦組織的不同區域中均不同程度地表達VDR，VDR在神經元和神經膠質細胞中均有表達，且VDR主要位于細胞核。1α，25(OH)2D3 能夠穿過血腦屏障經內分泌途徑直接進入大腦，與腦細胞中的 VDR 結合后對中樞神經系統發揮重要作用。VDR基因多態性及維生素D缺乏與兒童生長發育，尤其是神經系統發育的關系越來越受到關注。