[發明專利]微生物的檢測裝置和檢測方法

在審

• 申請號: 202211092936.2
• 申請日: 2022-09-08
• 公開（公告）號: CN115572758A
• 公開（公告）日: 2023-01-06
• 發明（設計）人: 關燁鋒;彭潔;黃旭光;廖麗敏;顏宇東;劉華敏
• 申請（專利權）人: 廣東順德工業設計研究院（廣東順德創新設計研究院）
• 主分類號: C12Q1/686
• 分類號: C12Q1/686;C12M1/34;C12M1/36;C12M1/00;B01L3/00;G01N21/64
• 代理公司: 華進聯合專利商標代理有限公司 44224
• 代理人: 張靈莉

1.一種微生物的檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

將待測樣本采用液滴生成技術形成多個液滴，每個所述液滴中包裹有包含PCR反應劑和至多一個微生物的反應液；所述PCR反應試劑包括用于擴增目標微生物的基因片段的引物和與所述引物對應的檢測探針，所述檢測探針上連接有信號物質；及

將各個所述液滴中的反應液進行裂解反應和PCR反應后，檢測反應結束后的液滴中信號物質的信號強度，并根據所述信號強度確定含有目標微生物的液滴數量以確定待測樣本中的目標微生物的數量。

2.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述信號物質包括熒光基團，所述熒光基團包括FAM、HEX、VIC、CY5、ROX、Texsa Red、JOE及Quasar705中的一種。

3.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述PCR反應試劑包括用于擴增目標微生物的不同基因片段的引物和對應的檢測探針。

4.根據權利要求3所述的檢測方法，其特征在于，不同基因片段的檢測探針上連接的信號物質相同，且不同的基因片段的檢測探針的濃度不同；

或者不同基因片段的檢測探針上連接的信號物質不同。

5.根據權利要求3所述的檢測方法，其特征在于，所述PCR反應試劑還包括緩沖劑、擴增酶和dNTP。

6.根據權利要求1～5中任一項所述的檢測方法，其特征在于，所述液滴的平均直徑為100μm～120μm。

7.一種微生物的檢測裝置，其特征在于，包括：

液滴生成機構，用于將待測樣本制成多個液滴，每個所述液滴中包裹有包含PCR反應劑和至多一個微生物的反應液；所述PCR反應試劑包括用于擴增目標微生物的引物和與所述引物對應的檢測探針，所述檢測探針上連接有信號物質；

PCR反應機構，用于對各個所述液滴中的反應液進行裂解反應和PCR反應；

檢測機構，用于檢測PCR反應結束后的液滴中的信號物質的信號強度；

數據采集與分析機構，與檢測機構通訊連接，所述數據采集與分析機構用于采集所述檢測機構的檢測結果并進行統計分析。

8.根據權利要求7所述的檢測裝置，其特征在于，所述信號物質為熒光基團，所述檢測機構包括激光光源模塊、第一二向色鏡、反射鏡、非球面透鏡、第二二向色鏡、第一檢測模塊和第二檢測模塊；

激光光源模塊用于提供激光；

所述激光光源模塊、所述第一二向色鏡、所述反射鏡和所述非球面透鏡形成用于激發液滴發出熒光的第一光路；

所述非球面透鏡、所述反射鏡、所述第一二向色鏡和所述第二二向色鏡形成供所述第一檢測模塊或第二檢測模塊檢測所述熒光的第二光路；

所述第一檢測模塊和所述第二檢測模塊分別獨立地與所述數據采集與分析機構通訊連接，所述數據采集與分析機構用于收集并分析所述第一檢測模塊和所述第二檢測模塊的檢測結果。

9.根據權利要求8所述的檢測裝置，其特征在于，所述第一檢測模塊包括第一濾光片、第一球面透鏡、第一小孔和第一熒光探測器，經所述第二向色鏡反射的熒光依次經過所述第一濾光片、所述第一球面透鏡和所述第一小孔后被所述第一熒光探測器檢測，所述第一熒光探測器與所述數據采集與分析模塊通訊連接；

所述第二檢測模塊包括第二濾光片、第二球面透鏡、第二小孔和第二熒光探測器，經所述第二向色鏡透射的熒光依次經過所述第二濾光片、所述第二球面透鏡和所述第二小孔后被所述第二熒光探測器檢測，所述第二熒光探測器與所述數據采集與分析模塊通訊連接。

10.根據權利要求8或9所述的檢測裝置，其特征在于，所述激光模塊包括激光器、激光模塊小孔和激光模塊濾光片，所述激光器產生的激光依次經所述激光模塊小孔和所述激光模塊濾光片后到達所述第一二向色鏡，并經所述第一二向色鏡和所述反射鏡反射、所述非球面透鏡聚焦后形成用于激發液滴發出熒光的激光；

或者，所述液滴生成機構為微流控芯片。