[發明專利]LncRNA IFA及其在豬卵巢顆粒細胞中的應用

在審

• 申請號: 202211048028.3
• 申請日: 2022-08-30
• 公開（公告）號: CN115992135A
• 公開（公告）日: 2023-04-21
• 發明（設計）人: 李加琪;張哲;李念;李碩;胡夢婷;郭懿萱;袁曉龍;張豪;陳贊謀
• 申請（專利權）人: 華南農業大學
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12N15/85;C12N5/10;A61K31/7105;A61P15/08
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 張珍

1.一種長鏈非編碼RNA，其特征在于：命名為lncRNA?IFA，其核苷酸序列如SEQID?NO：1所示。

2.權利要求1中所述長鏈非編碼RNA相關的生物材料，其特征在于：為下述生物材料中的任意一種或多種組合：

1)編碼所述長鏈非編碼RNA的DNA分子；

2)含有1)中所述DNA分子的表達盒；

3)含有1)中所述DNA分子的重組載體，或含有2)中所述表達盒的重組載體；

4)抑制所述長鏈非編碼RNA表達的小干擾RNA片段；

5)含有1)中所述DNA分子的重組細胞，或含有2)中所述表達盒的重組細胞，或含有3)所述重組載體的重組細胞，或含有4)中所述小干擾RNA片段的重組細胞。

3.根據權利要求2所述的長鏈非編碼RNA相關的生物材料，其特征在于：

1)中所述DNA分子通過如下方式制備得到：提取豬卵巢顆粒細胞的RNA，將其逆轉錄成cDNA，以cDNA為模板進行PCR擴增，得到目的片段；

PCR擴增所用引物如下所示：

lncRNA?IFA?F：5’-GGCGATGCCTGGGTACATGG-3’；

lncRNA?IFA?R：5’-GAGACCGCGTCCACTCCGCC-3’。

4.根據權利要求2所述的長鏈非編碼RNA相關的生物材料，其特征在于：

3)中所述重組載體通過如下方式制備得到：將所述DNA分子連接到用限制性內切酶BamHI和Xba?I酶切后的pcDNA3.1載體上，得到重組載體。

5.根據權利要求2所述的長鏈非編碼RNA相關的生物材料，其特征在于：

4)中所述小干擾RNA片段的靶向序列為：5’-TGACCTGGGCGACGTAGCA-3’。

6.權利要求1中所述的長鏈非編碼RNA或權利要求2-5任一項中所述的長鏈非編碼RNA相關的生物材料在豬卵巢顆粒細胞中的應用，其特征在于：體外環境下，所述的長鏈非編碼RNA正調控細胞增殖、細胞凋亡、細胞活性、細胞周期進程中的任意一種或多種功能表型。

7.根據權利要求6所述的應用，其特征在于：

增加外源性lncRNA?IFA，促進細胞增殖、抑制細胞凋亡、提高細胞活性和/或加快細胞周期進程；抑制lncRNA?IFA表達，抑制細胞增殖、促進細胞凋亡、降低細胞活性和/或阻滯細胞周期進程。

8.權利要求1中所述長鏈非編碼RNA或權利要求2-4任一項中所述DNA分子或表達盒或重組載體在制備藥物中的應用，其特征在于：所述的藥物為下述藥物中的任意一種或多種組合：

Ⅰ.促進豬卵巢顆粒細胞增殖的藥物；

Ⅱ.抑制豬卵巢顆粒細胞凋亡的藥物；

Ⅲ.提高豬卵巢顆粒細胞活性的藥物；

Ⅳ.加快豬卵巢顆粒細胞的細胞周期進程的藥物；

Ⅴ.促進卵泡發育的藥物。