[發明專利]分泌抗鯉科皰疹病毒3型IL-10單克隆抗體的雜交瘤細胞株、單克隆抗體和應用

在審

• 申請號: 202211038900.6
• 申請日: 2022-08-29
• 公開（公告）號: CN115819521A
• 公開（公告）日: 2023-03-21
• 發明（設計）人: 王俊亞;陳靜;鄒鈞;桂朗;劉琴
• 申請（專利權）人: 上海海洋大學
• 主分類號: C07K14/03
• 分類號: C07K14/03;C12N15/70;C12N5/20;C07K16/08;G01N33/569;G01N33/577;C12R1/19
• 代理公司: 上海伯瑞杰知識產權代理有限公司 31227
• 代理人: 周一新

1.一種鯉科皰疹病毒3型IL-10重組蛋白，其特征在于，通過包含以下步驟的制備方法得到：鯉科皰疹病毒3型IL-10的開放閱讀框序列如SEQ ID NO:1所示，連接到表達載體pET-21d(+)上，將其轉入到表達菌株Rosetta(DE3)感受態細胞中，經IPTG誘導后離心，收集的菌體在超低溫高壓的條件下循環破碎8–12min，提取包涵體并用稀釋復性法于4℃復性36h，復性液經過濃縮和蛋白緩沖液置換后高速離心，取上清純化，得到鯉科皰疹病毒3型IL-10重組蛋白。

2.權利要求1所述的鯉科皰疹病毒3型IL-10重組蛋白在制備分子免疫佐劑中的應用。

3.一種分泌抗鯉科皰疹病毒3型IL-10單克隆抗體的雜交瘤細胞株，其命名為CyHV31-IL10(Cyprinuscarpio HerpesVirus31-IL10)，已于2022年08月17日保藏在位于湖北省武漢市武昌區八一路299號武漢大學校內的中國典型培養物保藏中心，保藏編號為CCTCCC2022212。

4.根據權利要求3所述的分泌抗鯉科皰疹病毒3型IL-10單克隆抗體的雜交瘤細胞株，其特征在于，其通過權利要求1所述鯉科皰疹病毒3型IL-10重組蛋白篩選得到。

5.權利要求3或4所述分泌抗鯉科皰疹病毒3型IL-10單克隆抗體的雜交瘤細胞株在制備診斷或檢測鯉科皰疹病毒3型感染的試劑中的應用。

6.一種抗鯉科皰疹病毒3型IL-10單克隆抗體，其通過權利要求3或4所述分泌抗鯉科皰疹病毒3型IL-10單克隆抗體的雜交瘤細胞株分泌得到。

7.權利要求6所述的抗鯉科皰疹病毒3型IL-10單克隆抗體在制備診斷或檢測鯉科皰疹病毒3型感染的試劑中的應用。

8.一種免疫檢測鯉科皰疹病毒3型的試劑盒，其包含權利要求6所述的抗鯉科皰疹病毒3型IL-10單克隆抗體。

9.權利要求8所述免疫檢測鯉科皰疹病毒3型的試劑盒在檢測鯉魚血液或體液中鯉科皰疹病毒3型IL-10的濃度的應用。

10.權利要求8所述免疫檢測鯉科皰疹病毒3型的試劑盒在檢測鯉魚切片組織中鯉科皰疹病毒3型IL-10的應用。